藤稔’葡萄VvGAI基因的克隆、亚细胞定位及时空表达分析.pdfVIP

园 艺 学 报 2011 ，38 （10）：1883 –1892 http: // www. ahs. ac. cn Acta Horticulturae Sinica E-mail: yuanyixuebao@126.com ‘藤稔’葡萄VvGAI 基因的克隆、亚细胞定位 及时空表达分析 1,2 1 1,* 1 1 1 杨 光 ，曹 雪 ，房经贵 ，宋长年 ，王 晨 ，王西成 1 2 （南京农业大学园艺学院，南京 210095 ； 黑龙江省农业科学院浆果研究所，黑龙江绥棱 152204 ） 摘 要：以‘藤稔’葡萄（Vitis vinifera × V. labrusca ‘Fujiminori ’）的茎、叶、花和果为试材，采用 RT-PCR 结合 RACE 技术，克隆获得 1 个推测为葡萄赤霉素响应因子 VvGAI 基因的 cDNA 序列，全长 2 295 bp ，其编码 590 个氨基酸。该基因在 GenBank 基因数据库的登录号为 HQ834311 。序列分析表明：VvGAI 与杨树、拟南芥、水稻的同源基因的氨基酸序列相似性分别为 68.56%、62.79%和 54.16% 。半定量与定量 PCR 结果都表明，VvGAI 在葡萄茎尖、叶、花和果等营养与生殖器官中均有表达，但在茎尖中的表达最 高，是一个与快速生长和分裂关系密切的基因。50 mg · L-1 赤霉素处理后，各阶段果实中 VvGAI 表达量趋 势与对照基本一致，但水平低于对照，其中幼果中表达量最高。洋葱表皮细胞的瞬时表达显示，VvGAI 蛋白定位于细胞核。 关键词：葡萄；VvGAI；克隆；表达；亚细胞定位 中图分类号：S 663.1 文献标识码：A 文章编号：0513-353X （2011 ）10-1883-10 Cloning ，Subcellular Localization and Spatiotemporal Expression of a VvGAI Gene from Grapevine ‘Fujiminori ’ 1,2 1 1,* 1 1 YANG Guang ，CAO Xue ，FANG Jing-gui ，SONG Chang-nian ，WANG Chen ，and WANG 1 Xi-cheng 1 2 （College of Horticulture，Nanjing Agricultural University ，Nanjing 210095 ，China； Berries Research Institute ， Heilongjiang Academy of Agricultural Sciences ，Suiling ，Heilongjiang 152204 ，China） Abstract ：Full length cDNA sequence of potential GA response factor gene （VvGAI）was cloned from grapevine ‘Fujiminori ’（Vitis vinifera × V. labrusca）using RT-PCR and rapid amplification of cDNA ends （RACE ）.