第三章 固定酶及反应动力学0.pptVIP

* * * * * * * * * 此时相当于将酶集中于反应器的某一部分空间内。因酶浓度与反应速率的正比关系，所以在底物浓度均匀时酶的不均匀分布对总速率无影响。一级动力学底物浓度亦与速率成正比，为何影响总速率？ * ③ 不用载体法 这是选择适当的条件，通过一定处理使酶固定在细胞内的—种方法。如葡萄糖异构酶是一种胞内酶，将生物细胞加热至60℃，10min，其他酶失活，则该酶被固定在细胞内，所以又称加热固定化。又如链霉菌细胞用柠檬酸处理使酶固定在细胞内，若再用壳聚糖处理，使之凝聚干燥即成固定化细胞。 2 辅基与辅酶的固定方法 2.1辅基的固定方法 对于与酶结合牢固的辅基，可以考虑在固定化酶时一般可以将辅基同时固定，但是在一些条件下．如酶蛋白与辅基结合弱而辅基容易泄露时，或者用于亲和层析来分离纯化相应酶等，必须将辅基固定。辅基固定化过程是，将载体与连接臂连接，再以适当反应与辅基连接。裁体应符合以下条件： 没有非专一件吸附，具有多孔性和—定的机械强度；具有适合与臂或辅基结合的功能基团；具有化学和生物学稳定性等.载体大多采用琼脂糖，也使用纤维素、多孔玻璃珠或合成高分子材料等。连接臂，尚需考虑其疏水性、亲水性、离子性和体积、长度等因素。选择偶联反应有两种情况： —是在不影响辅基活性条件下，引入适当的功能基团，如羧基或氨基等容易与载体连接；二是如果辅基分子本身具备有参与催化