第十六章转基因技术与作物育种3.pptVIP

第十六章 转基因技术与作物育种 转基因育种就是根据育种目标，从供体生物中分离目的基因，经DNA重组与遗传转化或直接运载进入受体作物，经过筛选获得稳定表达的遗传工程体，并经过田间试验与大田选择育成转基因新品种或种质资源。 它涉及目的基因的分离与改造、载体的构建及其与目的基因的连接等DNA重组技术；通过农杆菌介导、基因枪轰击等方法使重组体进入受体细胞或组织以及转化体的筛选、鉴定等遗传转化技术和相配套的组织培养技术；获得携带目的基因的转基因植株(遗传工程体)；遗传工程体在有控条件下的安全性评价以及大田育种研究直至育成品种。 与常规育种技术相比，转基因育种在技术上较为复杂，要求也很高，但是具有常规育种所不具备的优势。主要体现在： (1)转基因育种技术体系的建立使可利用的基因资源大大拓宽。实践表明，从动物、植物、微生物中分离克隆的基因，通过转基因的方法可使其在三者之间相互转移利用。 (2)转基因育种技术为培育高产、优质、高抗，适应各种不良环境条件的优良品种提供了崭新的育种途径。这既可大大减少杀虫剂、杀菌剂的使用，有利于环境保护，也可以提高作物的生产能力、扩大作物品种的适应性和种植区域。 (3)利用转基因育种技术可以对植物的目标性状进行定向变异和定向选择，同时随着对基因认识的不断深入和转基因技术手段的完善，对多个基因进行定向操作也将成为可能，这在常规育种中是难以想象的。 (4)利用转基因技术可以大大提高选择效率，加快育种进程。此外，通过转基因的方法，还可将植物作为生物反应器生产药物等生物制品。正是由于转基因技术育种具有上述强大的优势，使得转基因技术从发现到如今仅仅30年的历史就得到了快速的发展。 第一节? 作物的转基因技术 一、转基因技术的发展现状 (一)国际转基因植物研究与现状 自从20世纪70年代重组DNA技术创建到1983年第一株转基因烟草获得以来，至今已有35个科120种植物转基因获得成功。先后有30多个国家批准了3000多例田间试验，涉及的植物种类有40多种，2000年已有13个国家种植了商品化的转基因植物。1996—2001年全球转基因作物种植面积增加很快(图16—1)。到2001年全世界已种植转基因作物5260万hm2。 目前所种植的转基因作物主要为大豆、玉米、棉花和油菜等，其中以转基因大豆的种植面积最大。 转基因作物的主要目标集中在培育具有抗除草剂特性的农作物优良品种,其次为培育抗虫和毒病新品种上。 (二)我国转基因作物研究与利用概况 我国是世界上第一个商品化种植转基因作物的国家。自行培育的双价转基因烟草的抗病虫性达到60％，产量比对照增加15％，产值增加20％，1992年每亩增产200元，遗憾的是由于市场的原因现已不推广。 据农业部资料，到1999年我国已批准进行中试的转基因作物有48项，包括水稻、小麦、玉米、番茄、白菜、番木瓜、甜瓜、花生、棉花、烟草、广藿香等11种作物；主要目标性状是抗虫、抗病、耐盐、抗冻、耐储藏和抗衰老等。已批准环境释放的有49项，包括水稻、玉米、大豆、马铃薯、番茄、甜椒、线辣椒、棉花、杨树、烟草等10种。 目前经农业部审查并经全国基因工程安全委员会批准商品化生产的作物已有我国自行研制开发的抗虫转基因棉花、美国Monsanto公司开发的Bt抗虫棉、延迟成熟期的转基因番茄、抗黄瓜花叶病毒(CMV)转基因番茄、抗CMV转基因甜椒及转查尔酮合酶(CHS)反义RNA基因矮牵牛。但是除了转基因抗虫棉已经大面积生产外，后几种作物的种植面积仅在1 hm2左右。 二、转基因育种的程序 利用转基因技术进行作物育种的基本过程可分为：目的基因或DNA的获得；含有目的基因或者DNA的重组质粒的构建；受体材料的选择和再生系统的建立；转基因方法的确定和外源基因的转化；转化体的筛选和鉴定；转基因植株的育种利用。 (一)目的基因的获得 目的基因的获得是利用作物转基因育种的第一步。根据获得基因的途径主要可以分为两大类：根据基因表达的产物——蛋白进行基因克隆；从基因组DNA或mRNA序列克隆基因。 (二)目的基因重组质粒的构建 通过上述方法克隆得到目的基因只是为利用外源基因提供了基础，要将外源基因转移到受体植株还必须对目的基因进行体外重组。质粒重组的基本步骤包括：从原核生物中获取目的基因的载体并进行改造；利用限制性内切酶将载体切开，并用连接酶把目的基因连接到载体上，获得DNA重组体。 已经分离的目的基因一般都保存在大肠杆菌内的一类辅助质粒中，常用的有pBR322系列、pUC以及pBluescriptK+(—)系列等。在进行外源基因转移前还必须将外源基因重组到合适的载体上，具体采用哪种载体要根据转基因的方法和目的而定。Ti质粒转化载体