第六章 无菌动、悉生.ppt

按对微生物的控制的程度，可以将实验动物分为五类，即：（１）无菌动物（GF）；（２）悉生动物（GN）；（３）无特定病原体动物（SPF）；（４）清洁动物（CL） ；（ 5）普通动物（CV）。 无菌动物和悉生动物饲养于隔离器中（隔离系统），无特殊病原体动物饲养于屏障系统，通常动物饲养于开放系统。 近交系动物遗传均一、个体差异小、实验结果比较准确。但是只从遗传上加以控制，如不进行微生物控制，没有排除自然感染的微生物和寄生虫的影响，实验结果仍可能不准确。因此，在精度要求高的实验中，无菌动物、悉生动物和无特殊病原体动物就成了理想的实验动物。  第一节 无菌动物 一、无菌动物的基本概念 所谓无菌动物，就是指在机体的任何部位均检不出任何活的微生物和寄生虫的动物。 无菌动物的“菌”主要是指细菌，而严格来说，还包括真菌、立克次氏体、支原体和病毒等微生物及各种寄生虫。 用大量抗菌素可以使普通动物暂时无菌，但是这种动物不是无菌动物。因为这种无菌状态往往是一过性的，某些残存的细菌在适当的条件下又会在体内增殖。 即使能把体内细菌全部杀死，它们给动物造成的影响却是无法消除的，例如：特异性抗体的存在、单核吞噬细胞系统的活化、某些组织或器官的病理变化等。 因此，无菌动物必须是生来就无菌的动物。 现在无菌动物的品种已经很多，不仅小鼠、大鼠、豚鼠和家兔等小动物已有无菌动物，而且狗、猫、猴、猪、山羊、绵羊和牛等大动物以及鸡、火鸡、鹌鹑、青蛙、蛇甚至蚕、苍蝇、白蚁等也都有了无菌动物。这些都是为了适应科学发展的需要而培育的，其中的小鼠、大鼠、豚鼠，国外一些发达国家已能大量生产，并比较方便地应用于日常研究中了。 三、无菌动物的特征 只要饲料配备适当，无菌动物发育正常，外观和普通动物相同，但是其机能、结构和普通动物有很大的不同。无菌动物受两个因素影响，即微生物和因饲养比较聚集而致的肾上腺增大。 无菌动物的形态特征 四、无菌动物的应用1、在微生物研究中的应用：⑴某些疾病的病原研究；⑵微生物间的拮抗作用；⑶病毒病的研究； ⑷细菌学研究：如霍乱弧菌、福氏痢疾杆菌；⑸真菌感染研究；⑹原虫感染研究。2、在免疫学研究中的应用： 无菌动物血中无特异性抗体，很适合于各种免疫现象的研究； 3、在放射医学研究中的应用；4、在营养代谢研究中的应用；5、在胆固醇代谢研究中的应用；6、在毒理学研究中的应用；7、在肿瘤研究中的应用；8、在老年病学研究中的应用；9、在宇航学研究中的应用；10、在寄生虫研究中的应用；11、在口腔医学研究中的应用。 健康动物处死 浸在37℃灭菌液中送进无菌隔离器 剖腹手术切除子宫 将子宫浸消毒液即送到另一只隔离器中 切开子宫取胎， 用灭菌纱布揩拭仔体并电刀断脐 放入隔离器内人工喂乳或保姆代养。 豚鼠因在一定程度上能自力饮乳，故人工哺乳较容易。另外，禽类、鱼类、昆虫类等，因是在卵中无菌的前提下作出的，故用药物将卵周围灭菌后移入灭菌隔离器内使其孵化即可，而且，这些动物，一般在出生后就能自力采食，故较易育成。  无菌动物的理论基础和实践依据在于胎盘屏障和屏障观念，根据这个基础开展了无菌动物工作。在无菌条件下取仔，一切操作在无菌隔离器内进行。  塑料无菌隔离器大小为1.80米×0.65米×0.5米 第二节悉生动物 一、悉生动物的概念 悉生动物（Gnotobiotic Animals）也称已知菌动物或已知菌丛动物，是指用与无菌动物相同的方法取得饲养（剖腹取胎，在隔离器内饲养）、但明确体内所给予的已知微生物的动物，即凡含有已知的单菌、双菌、三菌或多菌的动物。一般是将1～3种已知的微生物人工接种于无菌动物体内定居。 以此类推。由于此种动物和无菌动物一样是放在无菌隔离器内饲养的，因此选用此种动物作实验准确性是很高的，可排除动物体内带有的各种不明确的微生物对实验结果的干扰，并可按研究目的来选择某种微生物，常用于研究微生物和宿主动物之间的关系。 悉生动物是使特定的微生物定居于无菌动物的动物，饲养方法与无菌动物相同。由于这种动物是有菌的，所以隔离器内也有这种微生物的存在。 二、悉生动物的发展  随着科学的发展，向实验动物提出了更高的要求，就是如何消除实验动物自身疾病对实验结果的干扰，实验证明：除了剖腹产所获得的仔畜，饲养在严格的无菌隔离屏障内，没有另外的办法可以消除实验动物本身所带的传染性疾患，从而使无菌隔离技术的应用，从研究微生物与宿主之间的相互依存关系，推广到高质量实验动物的生产。  悉生动物大规模地生产和广泛应用于医学研究的各个领域，取得了普通动物实验所无法发现的丰硕成果，这就丰富了无菌动物的研究内容。 近二十年来是无菌动物研究的飞跃发展阶段，形成了跨越生物学、医学、兽医学