DNA限制性内切酶—∫姜酶切Buffer组分及其活性.docVIP

DNA限制性内切酶——酶切Buffer组分及其活性 TaKaRa公司，为了方便限制酶的统一使用，采用了通用缓冲液 (Universal Buffer) 测定限制酶活性的体系 (5种通用缓冲液中， 用??标注的)，以此时的活性值作为100%。并把在其它通用缓冲液中的相对活性表示如下表。有 ( ) 标记的是易受Star活性影 响的缓冲液，为了避免Star活性的影响，希望尽量使用??或??标注的缓冲液。每种限制酶都有其自身的基本缓冲液 (Basal Buffer)，其中AccⅢ、BalⅠ、BcnⅠ、BglⅠ、Bpu1102Ⅰ、Cfr10Ⅰ、Eam1105Ⅰ、Eco52Ⅰ、NruⅠ、PshBⅠ、SnaBⅠ、SspⅠ、TaqⅠ、VpaK11B Ⅰ(共14种)由于没有十分合适的通用缓冲液，只能使用基本缓冲液(Basal Buffer)。各种限制酶的基本缓冲液组成不同，相互之间不能通用。各种限制酶在基本缓冲液中的相对活性也被列于下表，供参考。 ? 限制酶在各种缓冲液中的相对活性 ? ?附带·活性测定用Buffer?????推荐使用的Buffer ?*1?+0.01%BSA→100%:?Afl?II,?Aor13H I,?EcoO65 I,?Fok?I,?Hin1 I,?Mun?I,?Nco?I,?Pvu?I,?Sse8387 I,?Xba?I?*2?+0.01%BSA+0.01%Triton X-100→100%:?Not?I*3?不加BSA ? 按Universal Buffer分类的限制酶 ? 各Universal Buffer的组成 ? ? ■ 使用注意事项 10×Buffer都为10倍浓度的缓冲液。此外，10×T溶液中不含BSA， 在使用时将BSA添加进去，使最终浓度为0.01%，有些限制酶(带有*1或*2标记)的反应体系中需加BSA或Triton X-100，添附的溶液是10倍浓度 (0.1%) 的液体，使用时，请在反应体系中添加1/10量进行反应。 ? ■ 保存 -20℃ ? 反应停止液组份表 (10 × Loading Buffer) 1% ????????SDS 60% ????????Glycerol 0.05% ????????Bromophenol Blue ? ■ 使用方法 本公司的酶包装中全部附带有反应停止液。使用时请添加反应液量的1/10，即可停止反应，进行电泳。-20℃保存时，会出现SDS沉淀，请于温水浴中溶解后使用。在室温下保存时，SDS有时也会出现沉淀，此时同样请于温水浴中将其溶解后使用。 ■ 保存 开封后室温保存。