赣南柑桔-柑桔衰退病.pptVIP

柑桔衰退病  Tristeza 周 彦西南大学柑桔研究所/中国农科院柑桔研究所  一、 概论 柑桔衰退病是一种严重的世界性柑桔病害,主要通过蚜虫和嫁接进行传播。  1、衰退型衰退病 引起以酸橙作砧木的甜橙、宽皮柑桔和葡萄柚的衰退死亡。 甜橙上衰退型衰退病 上世纪30年代阿根廷衰退病的为害 （2）茎陷点型衰退病：发生在来檬、葡萄柚、八朔柑、大部分柚类和某些甜橙品种上。病株木质部表面出现棱形、黄褐色大小不等的陷点，叶片扭曲畸形、枝条极易折断、植株矮化、树势减弱、果实变小。 柚茎陷点型衰退病 粗柠檬砧木上陷点症状 （3）苗黄型衰退病：发生在酸橙、尤力克柠檬、葡萄柚或柚的幼龄实生苗。在生产上不重要。 葡萄柚（左）、酸橙（右）上的苗黄反应 三、寄主感病性 不同柑桔类型对衰退病的敏感性存在差异： 枳是抗病的； 宽皮柑桔、粗柠檬和大部分甜橙是耐病的； 来檬、葡萄柚、部分甜橙和大多数柚表现茎陷点症状； 酸橙、尤力克柠檬、葡萄柚和柚类实生苗可表现苗黄症状。 四、我国衰退病发生情况 CTV在我国的分布极为普遍，以茎陷点型强毒株混合发生为主； 我国长期使用枳壳、酸桔、红桔等抗病或耐病砧木，因此除个别地区外没有出现衰退型衰退病引起的显著为害； CTV是引起四川、重庆、广西和浙江等地柚茎陷点型衰退病的重要病原。 1.对发病原因的认识过程 嫁接不亲和： Bar-Joseph 等（ 1981） 毒素： Toxopeus等（1937） 病原物： Webber等（1943） 可能是病毒：Fawcett 等 （1946 ） 病毒：Kitajima等（1964 ） 引起柑桔衰退病的柑桔衰退病毒（Citrus tristeza virus，（CTV））是长线形病毒属的正义单链RNA病毒，病毒颗粒细长弯曲，是目前已知植物病毒中基因组最大的。 CTV基因组图示 嫁接和蚜虫传播 蚜虫以非循环型半持久方式传播CTV； CTV的颗粒很长，发生断裂后易失去侵染能力，通过汁液摩擦接种的成功率很低。 菟丝子传播 除柑桔外，衰退病可侵染芸香科其它属的某些种和西番莲。 八、病害鉴定 一、指示植物鉴定 使用墨西哥来檬、酸橙、酸橙砧甜橙、葡萄柚、敏感的甜橙（赛蒙丝甜橙）和敏感的柚类（琯溪蜜柚）等6种指示植物同时鉴定，以明确复合物的类型。 墨西哥来檬的叶部症状 墨西哥来檬叶脉木栓化 墨西哥来檬的茎陷点症状 作为指示植物的甜橙 symons甜橙的茎陷点症状 酸橙上的苗黄反应 酸橙砧木树皮内面凹陷症状 二、血清学检测 采用直接组织点免疫（DTBIA）、酶联免疫（ELISA）、夹心法（DAS-ELISA）检测。 DTBIA检测甜橙上CTV发生情况 ELISA检测衰退病 三、RT-PCR检测 PCR循环--变性 PCR循环--变性 PCR循环--变性 PCR循环—退火 PCR循环—延伸 PCR循环—延伸 PCR循环—延伸 PCR循环—延伸 RT-PCR检测甜橙上CTV发生情况 四、多态性分析 　是指单链DNA由于碱基序列不同可引起构象差异，这种差异将造成相同或相近长度的单链DNA电泳迁移率不同。据此，可用于DNA中单个碱基的替代，微小的缺失或插入的检测。利用聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）检测结果。 通常与PCR技术联合应用，又被称为PCR-SSCP。 PCR-SSCP过程： 引物 ↓ 32P-dNTP掺入 PCR扩增 产物 ↓ 变性 ↓ 单链DNA ↓ 中性聚丙烯酰胺凝胶电泳 ? ↓ 1 2 3 4 5 自显影 ↓