第32节：体外受精和早期胚胎培养2.pptVIP

1978年7月25日世界首例试管婴儿 资料上用到了什么生物技术？ 试管动物技术 通过 使卵子和精子在 条件下成熟和 ，并通过培养发育成 后，再经移植产生后代的技术。 体外 人工操作 早期胚胎 概 念：试管动物技术 受精 试管动物是哪种生殖方式？ 一、从试管牛说起 一、从试管牛说起 牛的生育率虽然很低，但是牛的卵母细胞却相当的多，其卵巢中卵母细胞数目要比一生中排卵数多1000倍左右 公牛产生的精子数目就更多了 伟大设想诞生了 借腹怀胎 二、体外受精 (1)卵母细胞的采集 (2)精子的获取 (3)受精 人工模拟体内环境（包括营养、温度、pH等），使卵母细胞成熟，同时使精子获能，最终完成受精作用，并有计划地保存胚胎或移植胚胎。 二、体外受精 (1)卵母细胞的采集和培养 1）对小鼠、兔，以及家畜猪、羊等卵细胞的采集： 最常用的方法是卵巢经过 处理，具体做法是给供体注射 ，使一头母畜一次排出比自然情况下多几倍到十几倍的卵子，之后从 中冲取卵子，直接与获能的精子在体外受精。 超数排卵 促性腺激素 输卵管 冲卵与排卵的区别？ 由超数排卵采集的卵母细胞已在体内发育成熟，不需培养可直接与获能的精子受精！ 二、体外受精 (1)卵母细胞的采集和培养 2）对大家畜或大型动物(如牛)卵细胞的采集： ①从屠宰场已屠宰母畜的 中采集卵母细胞。 ②活体采卵;即借助 、 ；或 。 等工具确定卵泡位置，直接从活体动物中吸取，在体外进行人工培养，使其成熟。 卵巢 超声波探测仪 内窥镜 腹腔镜 二、体外受精 (1)卵母细胞的采集和培养 借助超声波探头和屏幕的引导，从活母畜卵巢采集卵母细胞。 操作员先将带有超声波探头和采卵针的采卵器通过阴道插入子宫，同时通过将卵巢贴在探头上。根据B超屏幕所显示的卵泡位置，利用采卵针穿刺卵泡并同时抽吸卵母细胞。 超声波引导法： 二、体外受精 (1)卵母细胞的采集和培养 卵母细胞的成熟培养：CO2培养箱 由①输卵管冲取法(超数排卵)采集的卵母细胞已在体内发育成熟，不需培养可直接与获能的精子受精，而从②已屠宰母畜的卵巢中采集及③活体采卵得到的是未成熟卵母细胞需要在体外培养成熟。 二、体外受精 (2)精子的采集和获能 1）精子的采集方法： ——大家畜或大型动物。 ——体型较小，易于控制的动物。 ——野生动物或经济动物。 二、体外受精 (2)精子的采集和获能 2）精子的获能处理： ①培养法： ②化学诱导法： ——把精子放入获能液中。 ——将精子放在一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液中，用化学药物诱导获能。 例：对于啮齿动物、家兔和猪的精子，一般采用培养法。 例：对于牛、羊等家畜的精子常用化学诱导法。 二、体外受精 (3)受精 1）体外受精的场所： ①获能溶液 ②专用受精溶液 获能的精子和培养成熟的卵子，一般情况下在获能溶液或专用受精溶液中完成受精过程。 二、体外受精 2）体外受精的过程： (3)受精 目的是使卵母细胞发育到减数第二次分裂中期，才具备与精子受精的能力。 二、体外受精 比较项目 人工授精 体外受精 概念 场所 过程 胚胎发育场所 人工授精技术是指用相应的器械采集公畜的精液,再将其注入正在发情的母畜的生 殖道中,使母畜受孕的过程。 体外受精是指哺乳动物的精子和卵子在体外人工控制的环境中完成受精过程的技术 母畜的生殖道内 体外 人工采精→检查与储存精液→人工授精(用人工的方法将精液注入正在发情的母畜生殖道中) 受精(体外) 受精卵的形成和胚胎发育场所在母畜体内 受精卵的形成和早期胚胎发育在体外，胚胎移植后的胚胎发育在母畜体内。 三、胚胎的早期培养 1、胚胎早期的培养液： 发育培养液 2、发育培养液的成分： 盐类： 营养物质： 调节物质： 特有物质： 无机盐和有机盐 氨基酸、核苷酸 维生素、激素 动物血清 三、胚胎的早期培养 胚胎培养发育到适宜阶段时，可将其取出向受体移植或冷冻保存。 不同动物胚胎移植时间不同！ 牛、羊： ——桑椹胚或囊胚阶段 小鼠、家兔： ——卵裂期或囊胚阶段 试管婴儿： ——8个或16个细胞阶段 三、胚胎的早期培养 胚胎培养发育到适宜阶段时，可将其取出向受体移植或冷冻保存。 冷冻保存： 胚胎冷冻保存就是将动物的早期胚胎,采用特殊的保护剂和降温措施进行冷冻,使其在-196℃的液氮中代谢停止或减弱到足够小的程度,但又不失