中老年结直肠腺瘤癌变细胞免疫组化及增殖活性研究论文.docVIP

　　中老年结直肠腺瘤癌变细胞免疫组化及增殖活性研究论文 【摘要】 目的 探讨β-catenin、P53和增殖细胞核抗原（PA）在结直肠腺瘤癌变中的可能作用。方法 以免疫组织化学方法检测77例结直肠腺瘤（CRA）及癌变组织中β-catenin、P53蛋白及PA的表达情况。结果 CRA随上皮异型增生程度的提高及癌变的出现，β-catenin异常表达逐渐增高（P 0.01）。伴中、重度上皮异型增生的CRA和CRA癌变组织中，β-catenin核表达阳性率明显高于上皮轻度异型增生的CRA（P 0.01）。CRA伴轻度异型增生和CRA伴中、重度异型增生及CRA癌变3组的P53蛋白和PA表达依次增高，其阳性率分别为10.3%、43.8%、75.0%和17.2%、62.5%、87.5%。在β-catenin核表达阳性者中，其PA的强阳性表达率明显高于β-catenin核表达阴性者（69.7%和36.4%，P 0.05）；在P53蛋白表达阳性者中，其PA的强阳性表达率明显高于P53表达阴性者（72.4%和37.5%，P 0.05）。在CRA癌变组中.freela (CRA). Methods β-catenin and P53 and PA expression munohistochemical stain in 77 specimens of CRA together ild epithelial dysplasia (CRA-MD) , CRA oderate/severe epithelial dysplasia (CRA-D/SD) and CRA al expression of β-catenin increased during the transition from CRA-MD to CRA-D/SD to CRA-C(P 0.01).The nuclear expression of β-catenin in CRA-D/SD and CRA-C CRA-MD to CRA-D/SD to CRA-C, uch higher than the 36.4% of cases ay play important roles in the carcinogenesis of colorectal adenoma. 【Key s ; P53 protein; β-catenin ;proliferating cell nuclear antigen; immunohistochemisty. 结直肠腺瘤（CAR）是一种具有癌变潜能的良性病变［1］。Zhang等［2］用流式细胞术，定量研究了CRA癌变过程中rasP21、P53表达情况，发现CRA 由上皮不典型增生到癌变过程中，rasP21和P53蛋白表达量均呈明显递增趋势。为进一步探讨CRA癌变机理，我们采用病理形态学与免疫组织化学相结合的方法，检测了77例管状、绒毛状CRA及其癌变组织中β-catenin、P53和PA表达情况。 1 材料与方法 1.1 标本来源 收集我院和乐清第三人民医院1995年1月～2007年1月间中、老年人结直腺瘤癌变的活检和手术标本77例，按照《全国大肠癌病理研究统一规范》［3］之标准进行腺瘤分类、异型增生分级和腺瘤癌变的诊断。77例结直肠腺瘤癌变病例中男42例，女35例，年龄45～88岁，平均58.9岁。病变发生在结肠32例，直肠45例。肿瘤直径 1cm者37例，1～2cm者22例， 2cm者18例。病史在12个月内62例，12个月以上15例。管状腺瘤26例，绒毛状腺瘤24例，管状绒毛状腺瘤22例；所有腺瘤癌变标本均伴有轻、中、重度异型增生，本组将异型增生分为两类：重度（Ⅲ级）和轻度（Ⅰ级或Ⅱ级）异型增生。另选10例正常结直肠黏膜组织作为对照组。 1.2 方法 所有标本均经中性甲醛液固定，石蜡包埋后行4μm连续切片，除常规HE染色外均同时采用En vosion 法免疫组织化学染色标记，观察β-catenin、P53、PA的表达情况。所有单抗与多抗免疫组化试剂盒均购自福州迈新生物技术开发公司。实验步骤按试剂盒说明书进行，3种一抗稀释度均为1：100。采用En vosion法对全部病例及对照组正常黏膜进行免疫组化染色，染色前用微波炉进行抗原修复。以乳腺癌组织切片作阳性对照，以PBS替代一抗作为阴性对照。 1.3 结果判定 （1）β-catenin阳性反应限于细胞膜，而胞浆和胞核无着色者视为阴性；若细胞核或细胞浆出现棕黄色着色则视为β-catenin阳性。（2）P53蛋白及PA均为细胞核表达，呈棕黄色颗粒状，无阳性反应细胞为（-）；阳性细胞数占1%～25%者为（+）；阳性细胞数占26.5%～50%者为（++）；阳性细胞占51%～75%为（++