中药五倍子化学成分对早期龋再矿化作用的扫描电镜观察论文.docVIP

　　中药五倍子化学成分对早期龋再矿化作用的扫描电镜观察论文 楚金普，郝玉庆，李继遥，周学东 【摘要】 目的观察pH循环后中药五倍子化学成分对早期龋表面形态变化的影响，了解中药五倍子化学成分对人工早期釉质龋的再矿化作用。方法应用离体牛切牙制备人工釉质龋标本60例,随机分为6组：NaF组（阳性对照）、GCE组、GCE-B组、GCE-B1组、GCE-B2组和去离子水组（阴性对照），进行体外pH循环实验后，各组样本分别放入2.5%戊二醛液内固定24 h，4℃.freelical pounds of Galla Chinensis on the remineralisation of initial enamel carious lesions by scanning electron microscope in vitro. MethodsSixty bovine enamel blocks ly divided into six treatment groups.The lesions e for 12 days. Each daily cycle included 4 x 1 min applications ents;1,000ppm F aq. (as NaF, positive control); deionized aqueous solutions of four Galla Chinensis extracts (GCEs); GCE, GCE-B, GCE-B1, or GCE-B2. After pH-cycling,the enamel specimens icroscope.ResultsThe results shoents formed on the surface of carious lesion for the positive control, GCE, GCE-B and GCE-B1 groups except the GCE-B2 group and DD 龋病是发生在牙齿硬组织的一种慢性细菌性疾病，发病率高，分布广，严重影响人类口腔及全身健康。含氟制剂的使用是目前龋病预防最常用的方法，但氟制剂的使用具有明显的局限性，如氟斑牙、氟骨症等。因此，寻找新的安全、有效的防龋药物越来越受到龋病防治领域学者们的重视。 近年来中药在龋病防治方面的研究备受关注。本课题组前期研究发现，中药五倍子对口腔中与龋病发生关系密切的细菌有明显的抑制作用［1，2］，尤其五倍子还能促进早期釉质龋的再矿化 ［3～5］。本实验目的是利用扫描电镜(SEM) 观察五倍子处理早期釉质龋后的超微结构，进一步阐明五倍子促进早期釉质龋再矿化的作用机制，为五倍子防龋的推广应用奠定基础。 1 材料 五倍子为四川产五倍子Rhus chinesis Mill，由四川省天然药物研究重点实验室提供。其化学组分提取方法为：1 000 g五倍子粉碎，以3 000 ml去离子水于60～70℃水浴10 h，振摇，过滤，滤渣，重复上次操作，合并滤液，加活性炭脱色，过滤，滤液浓缩至稠膏状，加95%乙醇，搅拌溶解，过滤，乙醇液减压浓缩得类白色粉末状物约160 g，为五倍子多酚性化合物—总鞣质(Galla Chinensis extract ,.freell洗脱，减压浓缩至干，得GCE-B 2.7 g。将GCE-B（30%乙醇组分）取2 g样品以水溶解上样，洗脱液甲醇∶水（2∶8-3∶7-4∶6），收集，每份30ml,浓缩至干得白色粉末状物——GCE-B1和GCE-B2。经核磁共振氢谱（1H-NMR）、核磁共振碳谱（13C-NMR）的结构鉴定GCE-B1为没食子酸（Gallic acid），GCE-B2为没食子酸甲酯（Methyl Gallate）。 2 方法 2.1 釉质的预备 选择新鲜拔除的牛切牙,除去表面有机污染物，分离冠根, 冠部超声清洗，干燥，体视显微镜下观察无龋损、氟斑、裂痕。用硬组织切割机将牙冠切成5 mm×5 mm×2 mm大小的釉质块，唇面釉质用抛光机及碳化硅砂纸（800#→1200#→2400#）在流水下依次磨平、抛光。选择釉质块60个，超声清洗，自然干燥，釉质块表面开窗4 mm×4 mm大小 ,其余部位涂布两层抗酸指甲油。 2.2 人工龋实验将预备好的釉质标本 用嵌体蜡固定在自制的环形玻棒上，放入盛有脱矿溶液［2.2 mmol/L Ca(NO3)2，2.2 mmol/L KH2PO4、50 mmol/L醋酸，1.0 mmol/L NaN3，0.1mg/L NaF，用5 mol/L的KOH调至pH为4.5］的玻璃器皿中，釉质表面与溶液的比率为20 mm2/10 ml，磁搅拌仪搅拌（100 r/min），37℃脱矿3 d。