中药对抗再生障碍性贫血骨髓细胞凋亡的研究现状论文.docVIP

　　中药对抗再生障碍性贫血骨髓细胞凋亡的研究现状论文 .freelmed cell death,PCD),是指为维持内环境稳定,由基因控制的细胞自主有序性的死亡5。凋亡的发生是基因的表达、蛋白质的合成和细胞内Ca2+浓度的增高等多种自主性生物行为,有不同的信号传导系统介导和参与,是由很多膜受体及胞浆蛋白参加的一系列分子事件导致的一种细胞主动自杀过程。大致过程是细胞整合各种胞内外凋亡信号,通过细胞凋亡信号与其受体形成的复合物经胞浆信号蛋白传递至一组细胞凋亡的执行者caspases,在由激活的caspases对其特异性底物进行降解,最终导致细胞凋亡。在整个细胞凋亡过程中,信号传递、中央调控和结构改变是其发生和发展的三大阶段,其中信号传递是凋亡发生的关键。它是指内源或外源信号经胞膜、胞浆传至胞核引起基因及蛋白变化的过程。细胞凋亡信号传导途径大致有3条：①通过Fas(CD95)及其配体(FasL)启动上游再活化下游导致细胞凋亡；②通过线粒体途径。致凋亡因素作用于线粒体,使其膜电位改变,从而功能发生变化导致细胞凋亡；③既有Fas/FasL又有线粒体共同参与,二者在多个位点上相互交织、互为结果,使凋亡效应实现自我放大6。可见,在凋亡的细胞传导过程中Fas/FasL系统起着非常重要的作用。 再障患者T淋巴细胞处于激活状态,同时分泌功能失调,产生过量的造血负调控因子,从而表现出明显的造血抑制活性。正常情况下,激活的T淋巴细胞可在多种情况下发生凋亡,但有一种特殊的凋亡形式,称为激活诱导的细胞死亡(activation induced cell death,AICD),即当T淋巴细胞的表面分子TCR/CD3被激活后,若其再次受到刺激时,便可发生AICD。AICD主要通过Fas抗原与其配体FasL参与免疫反应过程中淋巴细胞数量的调控7,淋巴细胞被抗原激活后也开始表达FasL,而Fas在成熟T淋巴细胞中就有基础表达,在激活的T淋巴细胞中表达增加。Fas和FasL的同时表达使激活的T淋巴细胞在其发挥功能后立即凋亡,从而避免对机体的损伤。然而,再障患者处于激活的T淋巴细胞Fas表达明显下降,致使激活后的T淋巴细胞不能立即凋亡,导致对机体正常造血细胞的损伤。同时研究亦证实,再障患者骨髓CD＋ 34细胞表面Fas表达过度,与再障患者活化的T淋巴细胞中高表达的FasL结合,从而启动CD＋ 34细胞凋亡,引起造血衰竭。 2 实验研究 2.1 甘草酸 甘草酸是甘草的主要成分, 分子结构中含1分子甘草次酸和2分子葡萄糖醛酸。由于甘草酸在结构上与糖皮质激素相似,在体内可延缓皮质激素的代谢,且对下丘脑-垂体-肾上腺轴无明显影响,故作为皮质激素的替代治疗,目前已用于自身免疫疾病的治疗。体外研究表明, 甘草酸可显著抑制抗原对T细胞的过度激活作用及由TNF-α介导的细胞毒作用, 从而调节免疫反应；调节T细胞释放细胞因子,使Th1/Th2保持平衡。 研究表明,甘草酸可阻止Fas抗体介导的细胞凋亡,而再障的发病机制与Fas介导的造血干细胞凋亡有关8-13。因此,为甘草酸应用于再障的实验研究提供了思路。任氏等14通过免疫诱导小鼠产生再障模型,再采用不同剂量甘草酸治疗,观察甘草酸对免疫诱导再障小鼠骨髓造血功能的影响,结果表明,甘草酸可促进免疫诱导再障小鼠骨髓造血功能恢复,且具有剂量-效应关系。 2.2 三七皂苷 三七皂苷是中药三七的主要活性成分,能够刺激人骨髓红系、粒系造血祖细胞增殖和分化15,改善再生障碍性贫血小鼠的骨髓抑制并促进造血细胞增殖等16。王氏等17报道,在体外通过诱导红系、粒系分泌造血调节因子,间接地促进血细胞生成；邹氏等18报道,可明显地对抗Coγ射线照射小鼠的实验性骨髓抑制。三七皂苷不但促进CD34+造血干细胞增殖,使CFU-Mix集落形成增加,而且能够诱导CD34+细胞向粒系细胞定向分化19。盖氏等20报道,还能够改善免疫介导性再障小鼠骨髓的抑制,升高外周血白细胞。 陈氏等21用三七皂苷处理粒系HL-60、红系K562、巨核系CHRF-288和Meg-01共4种细胞株后,提取胞浆蛋白和核蛋白,观察Daxx、Fas、NF-kb和c-Rel蛋白的表达水平,结果发现,三七皂苷某种程度上能够通过抑制Daxx、Fas蛋白表达,而相应减少细胞凋亡；同时也能通过增加NF-κB和c-Rel蛋白表达促进细胞增殖,并阻止半胱天冬酶连锁链的活化而抑制造血细胞凋亡,为应用于临床治疗凋亡过度的疾病(如再障)提供了可能性。 2.3 中药复方 何氏等22研究扶正养营颗粒对免疫介导再障小鼠的作用机制,检测各组小鼠造血细胞凋亡以及相关调控蛋白Fas与Caspase-3的表达。研究表明,扶正养营颗粒能下调造血细胞表面基因蛋白Fas,并可抑制细胞凋亡过程中激活的关键激酶Caspa