反相高效液相色谱法测定百合中两种酚酸甘油苷的含量论文.docVIP

　　反相高效液相色谱法测定百合中两种酚酸甘油苷的含量论文 胡文彦，段金廒，钱大玮，朱玲英，钱士辉 【关键词】 百合；,,酚酸甘油苷；,,Regaloside,C；,,Regaloside,A；,,反相高效液相色谱法 摘要：目的测定百合中酚酸甘油苷Regaloside C及Regaloside A的含量。方法色谱柱为 Alltima C18 (4.6 mm ×250 mm ,5 μm)，以甲醇-水（27∶73）作为流动相，流速1.0 ml min1，检测波长325 nm。结果百合鲜品中 Regaloside C和Regaloside A平均回收率分别为99.8％和97.4％.freelination of Tine ted on a Alltima C18 column(4.6 mm ×250 mm ,5 μm).MeOHH2O(27∶73)obile phase. The flol min1.The detection .ResultsIn fresh lily, the average recoveries of regaloside C and regaloside A ethod is accurate, rapid and reproducible, can be used to determine the phenolic glycosides in lily. Key lancifolium Thunb.、百合 Lilium bro Baker或细叶百合 Lilium pumilum DC.的干燥肉质鳞叶［1］，卷丹主产于江苏宜兴。近年来国内外在百合化学成分、药理作用、临床应用方面进行了大量的研究［2,3］，但对于其成分含量测定以及质量控制的报道却很少［4～6］，有关酚酸甘油苷的含量测定未见报道。本文建立了卷丹中酚酸甘油苷 Regaloside C和 Regaloside A的高效液相色谱含量测定方法，以期为控制百合的质量提供科学依据。 1 器材 1.1 仪器 po lancifolium Thunb.。 2 方法与结果 2.1 色谱条件 色谱柱Alltima C18（4.6 mm ×250 mm, 5 μm）；流动相为水甲醇（73∶27）。流速1.0 ml min-1 ，检测波长325 nm，柱温30℃，进样量10 μl。在此条件下：样品中 Regaloside C和 Regaloside A与其他成分达到基线分离，理论塔板数 Regaloside C为5 982.078，Regaloside A为8 606.925。分离效果见图1~2。 1．Regaloside C 2．Regaloside A 图1 对照品（a）和百合样品（b）的HPLC色谱图（略） 1. 标准品 2. 样品 图2 Regaloside C和 Regaloside A光谱图（略） 根据 DAD检测器的的特点，我们比较了对照品和样品中 Regaloside C和 Regaloside A的光谱曲线，从图中可以看出，两条光谱图曲线完全吻合，说明在该色谱条件下分离效果好，无杂质干扰。 2.2 线性关系考察取对照品 Regaloside C 2.338 mg和 Regaloside A 6.174 mg，精密称定,分别置25 ml 量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得 Regaloside C 0.093 5 g l1，Regaloside A 0.246 9 g L1的储备溶液。分别精密吸取两种对照品储备溶液1 ，5，10，15，20，25 μl，分别进样，以进样量（X）为横坐标，对照品 Regaloside C和Regaloside A峰面积积分值（Y）为纵坐标进行回归， Regaloside C在0.10～2.62 μg范围内线性良好，Y＝2.12×106 X1.95×104 (r = 0.999 961)； Regaloside A在0.31～7.86 μg 范围内线性良好，Y =1.65×106X -5.59×104(r =0. 999 998)。 2.3 精密度实验 分别吸取0.093 5 g L1的 Regaloside C和0.246 9 g L1的 Regaloside A储备溶液,重复进样5次，进样10 μl/次，测定 Regaloside C和 Regaloside A峰面积，RSD分别为0.352%，0.359%。 2.4 供试品制备 取粉碎后的百合鲜品(洗净，晾干) 约20 g ，干品约3 g（鲜品105℃蒸气加热6 min，55℃烘干），精密称定，置于圆底烧瓶中，加40 %甲醇于80℃水浴上热回流提取2 次，提取时间为1 h/次。滤过，合并滤液，减压回收溶剂, 残渣加甲醇溶解并转移至