自噬基因Beclin1shRNA表达质粒的构建及其对宫颈癌细胞HeLa生长的作用.pdfVIP

四川 大 学 学 报 ( 医 学 版 ) 　2007; 38 (2) : 181 185　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 ( ) J Sichuan Un iv M ed Sc i Ed i ·论著 · 自噬基因B eclin 1 shRNA 表达质粒的构建及其对 宫颈癌细胞 HeL a 生长的作用 1 1△ 1 2 王赞宏 , 彭芝兰 , 段振玲 , 闫乃红 ( ) 1 四川大学华西第二医院 妇产科 成都 6 1004 1 ; 2 四川大学华西医院 眼科学研究室 　　【摘要】　 目的　构建自噬基因B ec lin 1 小发夹RN A ( sho r t h a irp in RN A , shRN A ) 表达质粒, 探讨B ec lin 1 抑 制后对宫颈癌H eL a 细胞生长的作用。方法　根据人B ec lin 1m RN A 编码序列, 设计RN A 干扰靶点, 构建B ec lin 1 表达质粒, 脂质体法转染人宫颈癌 细胞, 通过荧光定量 ( ) 和 检测其对 shRN A H eL a PCR R T PCR W e stern b lo t 细胞自噬基因 1 及蛋白表达的影响。 法分析其对细胞增殖、流式细胞仪检测其对细胞周 H eL a B ec lin m RN A M T T 期和细胞凋亡的影响。结果　构建的 shRN A 表达载体可以使H eL a 细胞中自噬基因B ec lin 1 的m RN A 及其蛋白 含量降低, 转染质粒的细胞生长增殖速度加快, 凋亡率降低。结论　成功构建了针对 自噬基因B ec lin 1 的 shRN A 表达载体, 通过转染H eL a 细胞, 可有效抑制细胞中B ec lin 1 的表达, 并促进细胞生长, 抑制凋亡。 【关键词】　 干扰　 自噬　 1　表达载体 RN A B ec lin 【中图分类号】　737. 33 Con struct ion of shRNA Expression Vectors f or A utophagy Gene B eclin 1 and Ef f ect of the vectors on Tran sf ected