生物技术制药-第二章-基因工程制药201309-201401-22.pptVIP

第一节 概 述 利用基因工程技术生产药品的优点： （1）可以大量生产过去难以获得的生理活性蛋白和多肽； （2）可以提供足够数量的生理活性物质； （3）利用基因工程技术可以发现、挖掘更多的内源性生理活性物质； （4）基因工程和蛋白质工程进行改造和去除内源性生理活性物质的不足之处。 （5）利用基因工程技术可获得新型化合物，扩大药物筛选来源。 第二节 基因工程药物生产的过程 基因工程技术是将所要重组对象的目的基因插入载体、拼接，转入新的宿主细胞，构建成工程菌(或细胞），实现遗传物质的重新组合，并使目的基因在工程菌(或细胞）内进行复制和表达的技术。 基因工程药物生产的上游和下游 上游阶段：目的基因分离、工程菌（或细胞）构建。上游阶段的工作主要在实验室内完成； 下游阶段：主要指的是从工程菌（或细胞）的大规模培养一直到产品的分离纯化、质量控制 基因工程药物制备的一般过程 基因工程基本过程 工程菌（或细胞）构建中重要的工具 工具：酶 限制性内切酶 连接酶 逆转录酶 Klenow 酶大片段（DNA聚合酶 I） 核酸酶S1 第三节 目的基因的获得 克隆真核基因常用方法：逆转录法和化学合成法。（不能直接分离？） 一、逆转录法 逆转录法就是先分离纯化目的基因的mRNA，再反转录成 cDNA，然后进行 cDNA 的克隆表达。 cDNA与模板mRNA序列严格互补，而不含内含