史上最强生物课件动物细胞工程—120108.pptVIP

MⅡ期卵母细胞质的作用 ⑷为什么用于核移植的供体细胞一般都选用传代10代以内的细胞？ 培养的动物细胞一般当传代至10～50代左右时，部分细胞核型可能会发生变化，其细胞遗传物质可能会发生突变，而10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型，而且细胞分化程度低，增殖能力强，有丝分裂旺盛，容易培养。 此外，即便动物的遗传基础完全相同，但动物的一些行为、习性的形成与所处环境有很大关系，核供体动物生活的环境与克隆动物所生活的环境不会完全相同，其形成的行为、习性也不可能和核供体动物完全相同，从这一角度看，克隆动物不会是核供体动物100%的复制。 ⑸你认为用上述体细胞核移植方法生产的克隆动物，是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗？为什么？ 绝大部分DNA来自于供体细胞核，但其核外还有少量的DNA，即线粒体中的DNA是来自于受体卵母细胞。 3.体细胞核移植技术的应用前景： 1.加速家畜遗传改良的进程 2.保护濒危物种 3. 生产医用蛋白质及组织器官的移植 4.了解胚胎发育和衰老过程； 追踪研究疾病的发展过程和治疗疾病 3、体细胞核移植技术存在的问题 P50 （1）成功率非常低 （2）克隆动物以表现早衰、生理缺陷等健康问题 成功率低，绝大多数克隆动物存在健康问题并表现出遗传和生理缺陷：如体型过大，异常肥胖，发育困难，脏器缺陷，免疫失调等。 5.1997年，美国威斯康星州的一个奶牛场有一头名叫卢辛达（Lucinda）的奶牛，年产奶量为30.8 t，创造了世界奶牛产奶量最高新纪录。目前世界各国高产奶牛场奶牛，年平均产奶量一般为十几吨，而我国奶牛产奶量年平均水平仅为3～4 t。 （1）能利用体细胞核移植技术克隆高产奶牛卢辛达吗？ 可以。 卢辛达有高产奶的遗传基础，利用卢辛达的体细胞克隆的奶牛其遗传物质基本上全部来自该奶牛，其克隆牛具有高产的遗传基础。 克隆牛再与高产的公牛自然繁殖，可得到很多高产的后代，从而加快奶牛改良进程。 但是该克隆牛不能无限制地推广，其数量不宜过多，以避免奶牛群出现近亲繁殖而引起种质衰退。 （2）如果将克隆高产奶牛卢辛达的任务交给你，你将如何对它进行克隆？ 从卢辛达耳朵上剪取一小块组织，在体外培养获得该组织的细胞。 从屠宰场取废弃的牛卵巢，抽取卵母细胞体外培养成熟。 用显微针去除卵母细胞的核，再将耳细胞注入卵母细胞，用电刺激方法使卵母细胞与体细胞融合。 用电刺激或化学物质激活注入了体细胞核的卵母细胞，使其完成减数分裂和发育过程。 核移植胚胎在体外短时间培养后，挑选正常卵裂的胚胎植入经同期发情处理的受体母牛体内 6.体细胞核移植技术在研究和应用上还存在什么问题？请你查阅资料，了解这方面的前沿动态。 ⑴研究方面： 克隆动物基因组重新编程的机制尚不清楚，克隆技术效率低，克隆动物畸形率高、死亡率高、易出现早衰等问题。这些问题尚在研究中。 ⑵应用方面： 生产克隆动物费用昂贵，距大规模应用还有一定距离。 处于减数第二次分裂中期( MⅡ)的卵母细胞，是使用最多的卵细胞受体，原因是： 1.这个时期的卵母细胞胞质环境，完全支持外来的各种胚胎细胞、体细胞的遗传物质的发育、分化。 2.这个时期的卵母细胞更加利于进行体外的显微操作。 成熟促进因子（MPF）是卵母细胞细胞质中重要的胞质影响因子，MPF的活性在卵母细胞减数分裂的MⅠ期和MⅡ期达到最高，受精或激活后，MPF迅速灭活，因此， MⅡ期卵母细胞中的MPF活性高，而受精卵中MPF活性低。MPF水平的高低可以影响供体和染色质的状态和复制 MⅡ期卵母细胞细胞核、细胞质已成熟，而MⅠ期卵母细胞中的细胞核、细胞质尚未成熟，其细胞质不能支持胚胎的全程发育。因此，尽管MⅠ期卵母细胞的MPF活性也高，但是不能用作受体卵母细胞。 ⑴.为什么对动物细胞进行培养时通常要添加血清？ 血清中含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等，其中有些氨基酸动物细胞本身不能合成，必须由培养液提供。 血清激素有胰岛素、生长激素等以及多种生长因子，能促进细胞的生长、增殖和贴附。 因此，细胞培养时，要保证细胞能够顺利生长和增殖，一般需添加10%～20%的血清。 ⑵.幼龄与老龄的组织细胞相比较，分化程度低的与分化程度高的细胞比较，哪一种更易于培养？为什么？ 细胞的衰老与动物机体的衰老有密切的关系，细胞的增殖能力与供体的年龄有关，幼龄动物细胞增殖能力强，有丝分裂旺盛，老龄动物则相反。 所以，幼年动物的组织细胞比老年动物的组织细胞易于培养。同样，组织细胞的分化程度越低，则增殖能力越强，所以更易于培养 ⑶.动物细胞培养要