GODPOD法测葡萄糖的反应进程曲线.pptxVIP

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2017-06-18 发布于福建
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GODPOD法测葡萄糖的反应进程曲线

GOD-POD法测葡萄糖的反应进程曲线试验终点法平衡法测定反应完成或达到平衡后底物或产物变化的总量，即测定反应物或产物的浓度。实验目的使用葡萄糖测定试剂盒，检测某一浓度的标准液，以观察反应达到平衡期的时间以及显色稳定性时间。试剂和方法 7.0mmol/L葡萄糖标准溶液 16.7mmol/L葡萄糖标准溶液 GOD-POD法操作步骤试剂空白管测定管葡萄糖标准溶液 20ul 水 20ul 酶酚工作液 3ml 3ml 操作步骤在500nm波长下以蒸馏水调零，前20min内每2min记录一次吸光度。10min后每3min记录一次吸光度，观察10min。用蒸馏水代替样品试剂检测试剂空白的反应时间进程曲线。每2min记录一次吸光度,可记录3～4个吸光度值。以吸光度为纵坐标,以反应时间为横坐标作图,观察线性期、平衡期出现的时间及显色稳定时间。注意事项生化反应是连续的。整个实验需要记录17个吸光度数据：测定管13（10+3）个，空白管4个。合理利用等待时间，组间配合。调零管不动，反应过程中，使用比色皿作为容器水浴。思考标准液浓度的选择为什么是7.0和16.7？若反应未能在规定时间内达到平衡，可能有哪些原因？结果评价空白管吸光度变化：试剂空白的吸光度是否符合要求；试剂空白的时间进程曲线是否平坦。测定管吸光度变化：反应能否在规定的时间内达到平衡；反应进程曲线应平滑，说明反应过程平稳。