病毒和亚病毒研究.pptVIP

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 1.3 防制措施——防重于治 1） 杜绝噬菌体的各种来源 应定期监测发酵罐、管道及周围环境中噬菌体的数量变化。充分做好环境卫生。 2）控制活菌体的排放 活菌体是噬菌体生长繁殖的首要条件，控制其排放能消除环境中出现特定的噬菌体。 3）使用抗噬菌体菌株和定期轮换生产用菌 选育和使用抗噬菌体的生产菌株是一种较经济有效的手段。 定期轮换生产菌种，可以防止某种噬菌体污染扩大，并能使生产不会因噬菌体污染而中断。 防制措施——治 噬菌体污染后的补救措施： 发酵早期：升温杀灭噬菌体，减少培养基中营养成分被破坏，再补充一些促进细胞生长的玉米浆等，重新接入大量健壮的、正常的种子，就可以继续进行发酵. 发酵中期：在噬菌体污染早期，大量接入另一菌株（不带前噬菌体）的种子液或发酵液，继续进行发酵，可以达到减少损失、避免倒罐的目的。 2 病毒在基因工程中的应用——载体 在基因工程中，把外源基因导入受体细胞并使之在受体 内表达的中介体。 除原核生物的质粒外，经改造后的病毒是其最好的载体. 1）噬菌体作为原核生物基因工程的载体 如科斯质粒—λ噬菌体经改造后的广泛使用的载体 2） 动物DNA病毒作为动物基因工程的载体 如猴病毒SV40已被成功改造成动物载体 3）植物RNA病毒作为植物基因工程的载体 如花椰菜花叶病毒CaMV被改造后已广泛而成功地得到应用 4）昆虫DNA病毒作为真核生物基因工程的载体 复习思考题 某发酵工厂的生产经常因噬菌体的“感染”而不能正常生产，有人说是外部感染，有人说是溶源菌裂解所致，请谈谈你的看法？并请设计一实验证明你的推测。 P81的第1、2、8、11。 小 结 阶段教学提示： 此前的教学内容主要是各种微生物的形态构造特征 和规律。 由于是初学，很容易混淆和分辨不清。较好的学习方法 是注重比较和归类，将有相似特征的微生物加以比较， 如将细菌与酵母菌、放线菌与霉菌、细菌与放线菌、霉 菌与酵母菌等两相比较，再结合实验课上所看到的微生 物形态特征加以区别与记忆，一定会事半功倍！ 欢迎拷贝课件进行复习。 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 5）裂解（释放） 当大量子代噬菌体成熟后，由于脂肪酶和溶菌酶的作 用，促使受体细胞裂解，从而完成子代噬菌体的释放. 吸附 侵入 早期：病毒特异性酶的合成 病毒核酸复制 病毒结构蛋白质合成 装配 释放 病毒大分 子合成 凡在短时间（如T系噬菌体，T4、T7、φX174 等）内能连续完以上5个阶段而实现其繁殖的噬 菌体称烈性噬菌体. 而当侵入宿主细胞后，由于噬菌体基因组整 合到宿主的基因组上，并随之同步复制，这种噬 菌体称温和性噬菌体（详后）。 2.1.2 噬菌体效价的测定 效价——表示每毫升试样中所含有的具侵染性的噬菌 体粒子数，又称噬菌斑形成单位（pfu）或感染中心数. 直径2mm的噬菌斑，其中噬菌体数可达十亿个！ 测定的方法——双层平板法 用双层平板法测出的效价比用电镜直接记数得到的效价低。 前者是计有感染力的噬菌体粒子，后者是计噬菌体的总数。 一步生长曲线可分为三个时期： ①潜伏期：指菌体的核酸侵入宿主细胞后至第 一个噬菌体粒子释放前的一段时间。 ②裂解期：指溶液中噬菌体粒子急剧增多的一 段时间。 ③稳定期：溶液中噬菌体总数达到最高点后的时期. 2.1.3 一步生长曲线 定量描述烈性噬菌体生长规律的实验曲线称作一步生长曲线。它可以反映噬菌体的3个最重要的特征参数——潜伏期、裂解期和裂解量。 2.1.4 溶 源 性 （lysogeny） 温和噬菌体（即溶源性噬菌体 lysogenic phage）感染宿主细胞后不能完成复制循环，而是将其核酸整合（插入）到宿主的核DNA上，随宿主DNA的复制 而进行同步复制。在一般情况下，不引起寄主 细胞裂解。 ——这一现象又称为溶源现象，其宿主菌称溶源菌。 温和噬菌体存在的3种形式： 游离态 成熟后被释放出宿主，同时保持侵染性的游 离噬菌体粒子(生物大分子的状态) 整合态 又称前噬菌体状态 营养态 前噬菌体经外界诱导后，脱离宿主基因组而 处于积极复制、合成和装配的状态。 附着或融合在溶源菌染色体上的温和噬菌体的核酸称为前噬菌体或原噬菌体。 前噬菌体 温和噬