实验1 微生物实验室规则 实验2培养基配制及灭菌课件.pptVIP

微生物学实验 华侨大学化工学院 实验1 微生物实验室规则、工作环境要求、实验记录、常用器皿材料和仪器设备 微生物实验的意义、研究进展和实验内容 一、研究内容 研究微生物的形态、结构、生理生化、遗传变异、微生物与其他生物、与自然界之间的关系 1. 机理研究：微生物适应环境的机制，鞭毛运动的机理等 （是生化和分子生物学研究的重要研究内容和研究材料。） 2. 微生物与实际应用 微生物与发酵工程 微生物与环境工程 微生物与农业 微生物与医学领域 微生物与食品工业 二、微生物学研究进展 微生物基因组学研究（Microbial Genomics） 不可培养微生物（Uncultured Microorganisms ） DNA芯片（DNA Chip） 三域学说（Bacteria, Archae,Eucaryote） 三、微生物学与Nobel奖 到目前为止，几十项Nobel生理学和医学奖，化学奖都与微生物学有关参考：沈萍教授《微生物学》绪论部分Nobel获奖者。 四、如何进行微生物学实验 严肃认真 科学态度 分析问题 搞清原理 五、微生物实验安排与考核 平时表现、基础实验：10+30% ，一次考试 考试：60% 课堂纪律 严格遵守实验室规章制度 严肃课堂纪律 不允许无故旷课、早退 迟到（3次） 实验室安全和卫生 安全 实验室严禁吸烟。 注意用水、用电和防火 正确使用化学试剂和仪器 正确清洗器具 禁止在实验室吃东西及饮水 实验废弃物分类处理，勿污染环境 卫生 每次实验需留下4位同学值日，协助保 持实验室清洁（班长及生活委员安排） 实验预习报告及实验结果 目的 原理 步骤 结果及分析 学习委员（报告批改后返给同学修改，再收回留档，统计分数） 周次 教学内容、作业及考试安排 周次 教学内容、作业及考试安排 3 实验1微生物实验室规则、工作环境要求、实验记录、常用器皿材料和仪器设备 实验2微生物营养成分配制和消毒灭菌技术 8 实验 7 放线菌的形态观察 霉菌的形态观察 4 实验3实验室环境及人体表面微生物的检查分离 实验4 显微镜的使用及细菌的简单染色法 9 实验8 酵母菌的形态观察 微生物大小的测定和计数 5 国庆放假 10 实验 9 水中细菌总数的测定 实验 10 滤膜法测定水中大肠菌群 6 实验3实验室环境及人体表面微生物的检查分离（结果观察及描述） 实验5 革兰氏染色法、细菌荚膜染色法 11 实验 11环境因素对微生物生长的影响 7 实验6 细菌芽孢染色法和鞭毛染色法 12 - 14 考试 分组及各组器皿清单 每组器皿清单 酒精灯         1个/人 镊子            1把/人 培养皿  5套/组 三角瓶（250 ml） 2套/组 烧杯（250 ml）    1个/组 载波片            10片/组 废液缸            1个/组 接种针/环        1把/组（或人） 玻棒               2根/组 试管               6个/组 试管架            1个/组 绳子                2段/组 蒸馏水瓶带滴管  1套/组 2人一组（最后一组3人）（按学号） 用后各自清理保管。损毁或丢失，找实验室管理老师登记赔偿并补领 实验2 微生物营养成分配制和消毒灭菌技术 一、目的要求 1、了解培养基制备原理，掌握培养基制备方法。 2、掌握干热灭菌和高压蒸汽灭菌的原理和方法。 3、学会培养皿、瓶口的包扎。 （二）灭菌原理 1 干热灭菌原理（蛋白质凝固变性） 一般繁殖体——80－100℃，1 h 芽孢——160－170℃，2 h ＜180 ℃ 2 湿热灭菌原理－高压蒸汽灭菌 在密闭的蒸锅内，锅内温度达121℃， 15 min－30 min，可以很快杀死各种细菌及 其高度耐热的芽孢（蛋白凝固变性）。 优点？ 三、实验器材 1、材料 琼脂粉、酵母膏（粉）、蛋白胨、NaCl等。 2、设备 天平（6台）、称量纸、量筒、玻璃注射器（3-5把）、烧杯、玻璃棒、pH试纸、标签，纱布（8层纱布，包扎瓶口用，每组1份）、报纸、三角瓶、绳子、试管及试管塞、酒精灯、火柴、药勺（4把）、高压蒸汽灭菌锅（1台）、烘箱（1台）、电热板（6台）等。 四、操作步骤 （一）培养基的制备 LB培养基(Luria-Bertani medium)为例 （试管 4-5ml；剩余装入三角瓶 ） 倒平板（5个）搁置斜面（4个 ） 干热或湿热 制备LB平板 待培养基冷却至45-60 ℃ （不烫手）时，于酒精灯火焰无菌区均匀倒入培养皿中（每个约20 ml），冷却后凝固成固体胶状平板（LB平板）。 搁置斜面：适