栀子双波长融合高效液相色谱数字化指纹图谱研究论文.docVIP

　　栀子双波长融合高效液相色谱数字化指纹图谱研究论文 【摘要】 目的采用双波长融合法建立栀子254 nm和326 nm波长下的融合HPLC指纹图谱。方法采用反相高效液相色谱法，使用CenturySIL C18 BDS柱(20 cm×4.6mm，5μm)，以1%醋酸水-1%醋酸乙腈为流动相，低压线性梯度洗脱，柱温（30.0±0.15）℃，采用DAD检测器同时采集2个特征吸收波长下的信号，测定10批不同产地栀子HPLC指纹图谱。结果用“中药色谱指纹图谱超信息特征数字化评价系统”软件建立了栀子254 nm和326 nm的双波长融合HPLC指纹图谱.freelethod. MethodsThe chromatographic fingerprints ple solution each time on a CenturySIL C18 BDS column (20 cm×4.6 mm，5 μm) posed of 1% acetate acid -l/min, the column temperature aintained at (30.00±0.15)℃ and the DAD detector ethod, acquired 41 mon peaks by taking the peak of geniposide as referential peak. The fingerprints of the Traditional Chinese Medicine fingerprint ation characteristics and the results . ConclusionThe dual-ethod can effectively control the quality of Fructus Gardeniae and overe the loation of mono-ethod for thoroughly and authentically revealing the characteristics of TCM. Key ethod; High performance liquid chromatography;Fingerprints; Super-information characteristic 栀子为茜草科植物栀子Gardenia jasminoides Ellis的干燥成熟果实，其味苦、寒，归心、肺、三焦经，具有泻火除烦、清热利尿、凉血解毒之功效。其主要化学成分有环烯醚萜苷类(如栀子苷)、有机酸类(如绿原酸)、色素(如藏红花素)，此外还有挥发性成分及多糖等［1］。文献中有对栀子进行指纹图谱研究的报道［2～4］，但由于栀子中环烯醚萜苷类、有机酸酯类、西红花苷类等成分的最大吸收波长不一致，建立单一波长下的HPLC指纹图谱难以对栀子进行整体表达和全面评价。曾有人应用融合方法对指纹图谱进行研究，但未能全面反映其信息 ［5～6］。本文运用二极管阵列检测器采集了2个特征吸收波长下的指纹图谱，用“中药色谱指纹图谱超信息特征数字化评价系统”软件［7］建立了栀子水提取液254 nm和326 nm的双波长融合HPLC指纹图谱，并对其进行了全面评价，将其与265 nm波长下指纹图谱进行对比，证明双波长融合指纹图谱优于单波长指纹图谱，符合建立中药指纹图谱的信息最大化原则。 1 仪器和试药 Agilent 1100 型液相色谱仪（配有二极管阵列检测器、低压四元梯度泵、在线脱气装置、自动进样器），Chem Station工作站（Agilent科技有限公司）。KQ-50B型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司），旋转蒸发仪RE52（上海亚荣生化仪器厂），Sarturius-BS110S 分析天平（北京赛多利斯天平有限公司）。绿原酸、栀子苷（中国药品生物制品检定所），乙腈（色谱纯，山东禹王实业有限公司），冰醋酸（色谱纯，天津市科密欧化学试剂开发中心），其它试剂均为分析纯，所用水为去离子水。10批栀子药材产自河南唐河县S1，贵州铜仁S2，安徽池州东至县S3，河南桐柏县S4，云南威信县S5，云南省红河哈尼族彝族自治州S6，浙江五凤乡S7，四川达县S8，江西金溪县S9，广西鹿寨县S10，经沈阳药科大学孙启时教授鉴定均为茜草科植物栀子Gardenia jasminoides Ellis的干燥成熟果实。 2 方法与结果 2.1 样品供试液制备栀子于60℃干燥40 min，粉碎后取约2.5 g，精密称定，加水50 ml，回流提取2 h，滤过，残渣加水30 ml，继续回流2 h，合并两次滤液，减压浓缩至20 ml，加乙醇至80%(V/V)，冷处避光放置、醇沉24 h，滤除沉淀，减压回收乙醇至无醇味，残液再用水定容至25 m