实验叶绿体的分离与观察.pptVIP

实验六 叶绿体的分离与观察 叶绿体是植物细胞所特有的能量转换细胞器，光合作用就是在叶绿体中进行的。 实 验 目 的 1. 通过植物细胞叶绿体的分离, 了解细胞器分离的一般原理和方法。 2. 观察叶绿体的自发荧光和次生荧光, 并了解荧光显微镜的使用方法。 实验原理 组织匀浆后悬浮在等渗介质中进行差速离心，是分离细胞器的常用方法。 一个颗粒在离心场中的沉降速率取决于颗粒的大小、形状和密度，也同离心力以及悬浮介质的粘度有关。在一给定的离心场中，同一时间内，密度和大小不同的颗粒其沉降速率不同。依次增加离心力和离心时间，就能够使非均一悬浮液中的颗粒按其大小、密度先后分批沉降在离心管底部，分批收集即可获得各种亚细胞组分。 试剂与器械 1. 器材 : 普通离心机、组织捣碎机、粗天平、荧光显微镜。烧杯2个, 250ml量筒1个, 滴管20支, 10ml刻度离心管20支, 试管架5个，纱布若干，载片和盖片各4片。 2. 试剂: 0.35mol/L氯化钠溶液，0.01%吖啶橙(acridine orange)。 （二）菠菜叶手切片观察 新鲜菠菜叶 ↓ 刀片切出一斜面置于载玻片上 ↓ 滴加1~2d氯化钠溶液 ↓ 盖上盖片显微镜下观察  实 验 结 果 （一）叶绿体的分离和观察 1. 普通光镜下，可看到叶绿体为绿色橄榄形，在高倍镜下可看到叶绿体内部含有较深