毛细管电泳高频电导法测定夏枯草中齐墩果酸和熊果酸的含量论文.docVIP

　　毛细管电泳高频电导法测定夏枯草中齐墩果酸和熊果酸的含量论文 【摘要】 目的 建立夏枯草中齐墩果酸和熊果酸的含量测定方法。方法 以布洛芬为内标，采用毛细管区带电泳，高频电导检测；未涂层弹性融硅石英毛细管柱55 cm×75 μm ID，有效长度46 cm；1.2 mmol/L三乙胺HCl（pH=10.60）， β环糊精（0.08 mmol/L）为运行缓冲液；分离电压12.5 kV；重力进样10 s（高度20 cm）。结果 齐墩果酸、熊果酸线性范围分别为4.1～114.8 μg/mL（r=0.9995）和4.3～120.4 μg/mL（r=0.9996）；平均回收率分别为96.7%和98.2%。结论 该法简便、准确、快速、重现性好，可用于夏枯草药材中齐墩果酸和熊果酸的含量测定。 【关键词】 毛细管电泳；高频电导检测；夏枯草；齐墩果酸；熊果酸 Abstract:Objective To establish a method for determining the content of oleanolic acid and ursolic acid in Prunella vulgaris. Methods Capillary electrophoresis ple. The separation ed on a uncoated fused silica capillary of 55 cm×75 μm（46 cm effective length）using 1.2 mmol·L-1 triethylamine as mol·L-1 βcyclodextrin, pH 10.60). The voltage perature ple ）. Results The linear ranges of oleanolic acid and ursolic acid L（r=0.9995）and 4.3～120.4 μg/mL（r=0.9996）, respectively. The average recoveries of oleanolic acid and ursolic acid ethod is reliable，rapid and accurate, ID，河北永年锐沣色谱器件有限公司）。 夏枯草样品（批号1：购自河南；批号2：购自安徽；批号3：购自贵州），均经广东药学院中药鉴定教研室房志坚副教授鉴定为真品。将其粉碎，于60 ℃下干燥4 h，置干燥器内备用。定量方法学考察采用的样品购自河南。 齐墩果酸对照品（批号：110709—200505）、熊果酸对照品（批号：110742—200516）、布洛芬对照品（批号：100179—200303）均由中国药品生物制品检定所提供，β环糊精（中国医药集团上海化学试剂公司），三乙胺等试剂均为分析纯，水为去离子水（电阻为16.6 MΩ·cm-1）。 2 实验部分 2.1 溶液的制备 2.1.1 内标溶液 精密称取布洛芬对照品40.6 mg置50 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为内标贮备液（质量浓度为812 μg/mL）。 2.1.2 对照品溶液 精密称取OA对照品16.4 mg、UA对照品17.2 mg置50 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液（质量浓度分别为328 μg/mL和344 μg/mL）。 2.1.3 供试品溶液 取本品粉末约1 g，精密称定，置索氏提取器中，加甲醇80 mL，加热回流2 h，放冷，提取液转移至100 mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，经0.45 μm滤膜过滤，作为供试品溶液。 2.2 电泳条件 未涂层弹性融硅石英毛细管柱55 cm×75 μm ID，有效长度46 cm；以1.2 mmol/L三乙胺HCl（pH=10.60），β环糊精（0.08 mmol/L ）为运行缓冲液；分离电压12.5 kV；重力进样10 s（高度20 cm）；温度25 ℃，湿度小于45%。毛细管柱在使用前依次用去离子水、0.1 mol·L-1的NaOH溶液、去离子水、缓冲液各冲洗5 min；检测电极和缓冲液容器用超声波清洗10 min。进样5次之后需按照上述步骤清洗毛细管。对照品、样品色谱图见图1。 2.3 方法学考察 2.3.1 标准曲线制备 分别吸取一定量的对照品贮备液、内标溶液，加甲醇稀释成含齐墩果酸质量浓度为4.1、8.2、16.4、32.8、49.2、82.0、114.8 μg/mL，熊果酸质量浓度为4.3、8.6、17.2、34.4、51.6、86.0、120.4 μg/mL与内标溶液质量浓度均为40.6 μg/mL的系列溶液。依次重力进样10 s，每个浓度测定3次以上。以对照品与内