棉铃疫病潜伏侵染的研究.pdfVIP

7， ／ 西北农业学报 Acta A ~|~ullurae Sin／ca 棉铃疫病潜伏侵染的研究 瞄 叫-2 单 卫 墨 李量 童 (西北农业大学虢保杀 胰西橱 睫 7J2JO0) 擒羹 分离试验确证，冉在于托病阶段拂持上限制性褐色坏死病组织中，疫南蕾并不完全失活， 说明{i病蕾存在iI收佳染．裤忤的托病挂^现在挑扩展上．裤持的缱病性与其曼育阶段和环境奈件 密切相关．花后35走以上的裤忤患病，而花后25天以】竹的劫持高度挑囊．新步认为。矗焉蕾任亲后 诱导曼生的病变特州是一溶性t如抗毒毒的j|积，是病蕾iI便任染及裤斡阶段托病性的重要机．I． 高湿等枉端环境能谤蔓抗病所扭的劫持 高虎患病． 关t调 裤忤裹病蕾(—咖—l●唧 占。●_r )IiI便任染I垃糟挑毒毒 潜伏侵染的病蕾侵入寄主后就摆脱了外界因子的干扰。无论生物防治还是化学防治均难 奏效．但我们发理接蕾后，在抗瘸阶段棉铃的褐色坏死组织中．棉铃疫病菌t 脚 妇 晴 )并不完全失活，说明棉铃疫病存在潜伏侵染。 1 祷波与方法 茁种为西北农业大学农作一站田问病铃的分离物。 棉铃接茵是以游动孢子悬液 (5×105．孢子，删)接种于不同发育阶段的离体带柄棉铃 (中 棉 12)，采用刺伤和无伤两种接菌处理。每重复 10铃，每处理 d重复，每铃 2接茸位点，每位点 20 ，置盛有自来承的指形臂中20C~25C保湿培养，光周期 14h，观察棉铃发育阶段与抗病 ， 群 性的关系。病情分级标准，0：不发病 I1：病斑直径5mn3I2：病斑直径 10mm，5Inmf3{病 斑直径10rflm。病情指数 ( )一 [ (病级×病斑毁)／(20×3)(最高级)]×100。 在棉铃发育早期，把游动孢子田问接种棉铃分批采圊，室内离体隔离培养，或取接菌位点 铃壳组织分离培养．分离培养采用选择性培养基配方t氨苄青霉素钠 250mgf氯霉素 100mgf 五氯硝基苯(PCNB，50 ，a．i．)100nlgf土菌消 (hymexazol，70 ，a．i．)50啷 f多菌灵 (50 ， i．)50mgIPD^1000ml。备药荆先溶于少量 70 乙醇中，倒平板前，按眈倒加入溶化的PDA 中。 。 潜伏侵染是将游动孢子悬液接种于抗病和感病 阶段的离体棉铃，20C～2d℃培养 24h 后，对接菌位点铃壳组织提取物进行抑菌活性分析，以不接菌棉铃为对．曛。采用乙醇(5g铃壳 组织用 20m1试剂于球箱中d℃～6℃过夜)和丙酮 (提取液用=氯甲烷 10ml除去其中的糖 分 ，所得油相在 40C~50C条件下除去溶剂)两种试剂粗据。将提取物溶于5ml70％乙醇中， 浸湿滤纸 (直径6．5nun)，经40C~S0C处理除去乙醇，将滤纸匿片呈三角状置于PDA和水洋 ·收 日期 l9日2一o9一¨ · 88 · 西北农业学报 卷 菜培养基 (wA)平板上，中央接种新鲜疫病菌菌饼 (直径 5．0ram)，2l℃～2d℃暗培养 7天 ·记 载菌落直径并镜检产孢状况。每处理重复 3次 取铃壳园盘(直径 6．5ram)=角形置于 WA或 PDA平板的园孔中，置冰箱中(2℃～4℃) 24h后弃去铃壳组织，接种新鲜疫病菌菌饼 (直径 5．0ram)，2l℃～24℃暗培养 7天 ，检测铃壳 中的水溶性抗菌物质。每处理重复 3次。产孢状况分级 ，0：不产孢；1：每视野 (1O0×镜)孢子 4个}2：每视野有孢子 5～9个 I3：每视野有孢子 l0个以上 每重复检查 10个视野。产孢强 度(％)= (：(产孢级数×视野数)／l0芒3(最高级))×1O0。 2 结果与分析