第7章线粒体生化课件华中师大.pptVIP

第七章 线粒体 一、线粒体的形态结构 (一) 形态、大小与分布 1.形态 2.大小 3.分布 4.数量 二、线粒体的化学组成 (一) 线粒体的化学组成 1.蛋白质 2. 脂质 3 RNA 4 DNA 1 亚线粒体颗粒的制备及拆离与重组 超声波 尿素 基粒 重组 线粒体 亚线粒体 亚线粒体 超离心 内膜 三、线粒体的功能 （一）三羧酸循环： 1. 糖酵解 在细胞质中，葡萄糖降解生成丙酮酸。 2. 三羧酸循环: 丙酮酸进入线粒体基质??在线粒体基质中,在丙酮脱氢酶体系作用下，丙酮酸进一步分解为乙酰辅?酶A。乙酰辅?酶A进入三羧酸循坏彻底氧化为CO2和H2O并释放能量。 (二) 氧化磷酸化 氧化磷酸化的分子结构基础 1.1. 电子传递链( 呼吸链) 1.2 ATP合成酶的分子结构与组成 分布 组成: F1(偶联因子F1) F0(偶联因子F0) 1.3 电子传递和氧化磷酸化的偶联??? 氧化磷酸化： NADH和FADH2是两种还原性的电子载体，它们所携带的电子经呼吸链传给氧时, 伴有ADP磷酸化形成ATP。 ADP+Pi ATP??? ?? ????? ( 三) ATP合成酶的作用机制 1分子结构 ( 二) 自主性的局限性 1. 基因组小 2. 合成的蛋白质种类少 线粒体中合成的多肽主要有细胞色素C氧化酶3个亚基。ATP合成酶中F0的两个亚基NADH—COQ还原酶，7个亚基和细胞色素b?。 3 mt DNA复制、RNA转录和蛋白质翻译所需的许多酶和蛋白质因子都是由核DNA编码的。 五、线粒体蛋白质的合成与运输 ( 一) 合成 导肽： 由核DNA编码的构成线粒体的蛋白质前体的N末端含有识别线粒体膜上特异受体，指导蛋白质在线粒体中定位的一段氨基酸序列，称为导肽。 其特点是： （1）含丰富的带正电荷的氨基酸；（2）羟基氨基酸含量也高；（3）几乎不含带负电荷的氨基酸；（4）可形成双亲性的螺旋结构。 ?六、线粒体的增殖与起源 *  外膜? ?????????? 内膜: 膜间隙???? ? 基质?或内室???? ? （二）线粒体的超微结构 ( 二) 线粒体酶的定位 2 利用抗体对内膜上的酶进行定位 分离纯化线粒体内膜上的各种成份 通过免疫学方法制备抗体 测定抗体与亚线粒体温育后特异酶蛋白的活性。 原理： 抗体与酶结合一般可抑制酶的活性 3线粒体上酶的分布 部位 标志酶 主要酶 外膜 单胺氧化酶 膜间隙 腺苷酸激酶 内膜 细胞色素氧化酶 电子传递链 ATP合成酶 基质 苹果酸脱氢酶 脂肪酸氧化酶系 三羧 酸循 环酶系（琥珀酸脱氢 酶除外）核酸和蛋白质合成酶系 线粒体呼吸链的组分 复合物Ⅰ 复合物Ⅱ 复合物Ⅲ 细胞色素C 复合物Ⅳ 辅酶Q 血红素 铁硫蛋白 电子传递的方向 (二) 氧化磷酸化的偶联机制 （1）电子传递链在线粒体内膜呈不对称分布。有些组分不仅可以传递电子，而且可以起质子泵的作用。 （2）当电子在内膜中迂回传递时所释放的能量将质子从内膜的基质侧泵至膜间隙，从而使膜间隙的质子浓度高于基质，因而在内膜两侧形成pH梯度和电位差。 （3）在这个梯度的驱动下，质子穿过内膜上的ATP合成酶流回基质，其能量促使ADP和Pi合成ATP。 1 化学渗透假说主要内容： : 2. 作用机制 旋转催化机制 四 、线粒体的半自主性 （一）自主性的证据 1 mt DNA 结构特点 复制： 方式 周期 2 RNA RNA的类型 RNA聚合酶 遗传密码子 3 蛋白质合成 核糖体 转录与翻译的时间和部位 起始氨酰tRNA 对抑制剂的敏感性 *