第二章 试管苗快速繁殖.pptVIP

2.1 试管苗快速繁殖意义和一般程序 2.1.1 试管苗快速繁殖意义 试管苗快速繁殖，是指利用植物组织培养技术对外植体进行离体培养，使其短期内获得遗传性一致的大量再生植株的方法。 试管苗快速繁殖是植物组织培养技术在农业生产中应用最广泛、产生经济效益最大的研究领域，涉及的植物种类繁多，技术日益成熟并程序化。 2.1.2 试管苗快速繁殖的一般程序 一般选择根、茎、叶器官为培养材料进行培养、壮苗与生根培养、试管苗驯化与移栽几个环节。 2.2.1.2 培养 多为无机离子浓度低的怀特培养基。也可用2／3 MS或1／2MS、B5培养基 注：离体根生长要求 　　　　 提供全部必需元素，蔗糖、硝态氮效果好，加入B1、B6最重要，生长素对离体根影响不一致。培养温度25－27℃，暗光培养。 2.2.4.4 植株再生途径 直接产生不定芽 形成愈伤组织 形成胚状体 其他途径 2.3 壮苗和生根培养 2.3.1 试管苗的壮苗培养 较高浓度的生长素与较低浓度的细胞分裂素组合有利于形成壮苗. 在生产实际中，增殖系数控制在 3.0-5.0时可实现增殖和壮苗的双重目的。另外，改善培养室环境条件，如增加光照强度、降低湿度等对培养壮苗也有一定帮助。 2.3.2 试管苗的生根培养 生根培养基：1／2或1／4MS基本培养基；不加或少加CTK，适量添加NAA；糖浓度1-1.5%。 培养条件：增加光强，达3000-10000lx。 2.3.2.1 生根方法与途径 将新梢基部浸入50 ppm或100 ppm IBA溶液中处理 4-8h； 在含有生长素的培养基中培养 4-6d 直接移入含有生长素的生根培养基中。 容易生根的植物，延长在增殖培养基中的培养时间即可生根； 适当降低增殖倍率，减少细胞分裂素的用量，即可增殖又可生根； 对易生根植物，切割粗壮的嫩枝用生长素溶液浸醮处理后在营养钵中直接生根，此方法省去了生根阶段，但只适于一些容易生根的植物。 2.3.2.2 影响试管苗生根的因素 植物材料 基本培养基 植物生长调节剂 培养条件 其它物质 2.4 试管苗的驯化与移载 试管苗生态环境与自然环境的差异 试管苗的特点　　 试管苗的驯化　　 试管苗的移栽　　 2.4.1 试管苗的特点 2.4.1.1试管苗的生态环境 （1）高温且恒温? （2）高湿? （3）弱光? （4）无菌 2.4.1.2 试管苗的特点 （1）生长细弱，角质层不发达 （2）光合作用差 （3）叶片气孔数少，活性差 （4）根吸收功能弱 2.4.2 试管苗的驯化 目的：提高试管苗的适应性，促其健壮，最终提高移栽成活率 原则：从温、光、湿度及有无杂菌等环境因素考虑。驯化开始数天内，与培养环境条件相似；后期与预计栽培条件相似，逐步适应。 方法：即炼苗。不开口自然光下2-3天，然后开口1-2天。 2.4.3 移栽基质的选配 河砂:河砂分为粗砂、细砂两种类型。粗砂即平常所说的河砂，其颗粒直径为1-2mm。 草炭土:草炭土是由沉积在沼泽中的植物残骸经过长时间的腐烂所形成，其保水性好，蓄肥能力强 腐殖土:腐殖土是由植物落叶经腐烂所形成。 2.4.4 试管苗的移栽 移栽方法：取出试管苗，全部轻洗去培养基栽入基质(事先浇透水)后，栽后轻浇薄水， 移入高湿环境(90%以上)。 移栽场所：日光温室 塑料大棚　 驯化室 2.5 移栽后管理 2.5.1 保持小苗水分供需平衡 1周内：?环境高湿，遮光。 1周后：揭膜，控水，增加光强. 半个月后：小苗生长后逐渐降湿，拱棚两端通风。? 2.5.2 防止菌类滋生 基质高压灭菌或3h烘烤灭菌或太阳能灭菌。 ◆适当使用杀菌剂、消毒剂。 ◆移栽时少伤苗。 ◆喷水加0.1%尿素或1/2MS大量元素液追肥，加快苗生长。 2.5.3 温度、光照条件的控制 适宜生根温度：18－20℃。 移栽初期弱光，后逐渐加强光照，过渡到自然光照。 2.5.4 保持基质适当的通气性 基质配比：珍：蛭：草( 腐殖土)=1：1：0.5 ，珍：草(腐殖土)=1：1 保持基质通气性：选颗粒状基质，浇水勿多。 2.6 组培中三大难题 污染的原因及预防 褐变的原因及预防 玻璃化的原因及预防 2.6.1 污染 2.6.1.1 污染的类型与症状 引起污染的微生物主要有芽孢杆菌、大肠杆菌等细菌和毛霉、根霉、青霉等真菌 。 细菌性污染的症状：培养基或培养材料表面出现黏液状或浑浊的