植物细胞〈培养∕工程〉系统简介与应用.pdf

植物細胞〈培養∕工程〉系統簡介與應用 國立高雄大學生命科學系 王恆隆副教授 hlwang@nuk.edu.tw §植物細胞培養的定義、原理與目的 §植物細胞的發展 A.建立培養基模式與荷爾蒙調控模式 B.培養基組成：無機鹽類、碳源、生長調節劑等 §植物細胞培養的種類 A.癒創組織培養； B.懸浮細胞培養； C.體胚培養； D.器官培養； E.花藥培養；F.原生質體培養 §植物細胞培養的型式 A.固態培養：試管、培養皿、三角瓶等玻璃或塑膠容器 B.液態培養：三角瓶、生物反應器 §植物細胞的研發應用 A.種原保存； B.各種倍數體的育成； C.基因轉殖；D.健康種苗生產； E.生產有用的二次代謝產物；F.食品工業； G.分子農場；H.學術研究 §植物細胞培養的基本配備 § 參考資料 § 植物細胞培養的定義、原理與目的 定義：以植物組織細胞為單位，在離體條件下，於適當的培養 基與無菌及環境條件，進行培養、分化或生產有用物 質。 原理：細胞全能性是指單一個活細胞具有產生完整生物個體的 潛力，即植物細胞具有去分化與再分化的能力 植物組織或細胞可以分離獨立培養，並具有分化全能性的概念 細胞全能性(totipotency) ： 指單一個活細胞具有產生完整生物個體的潛力，即植物細胞具有 去分化(de-differentiation)與再分化(re-differentiation)的能力 建立培養基模式與荷爾蒙調控模式 應用研究階段 目的：改善農業生產技術、保護自然資源、維護生態平衡、生物醫藥開發 培養基組成：無機鹽類、碳源、生長調節劑等 Auxin: Cytokinin: Gibberellin: Abscisic acid: 常用培養基配方 Murashige Skoog Essential vs. Beneficial elements § 植物細胞培養的種類 A.癒創（合∕傷）組織（callus ）培養： 受傷的植物組織經過培養數日後會長出形狀不規則的一團細胞—癒創組織 甘藷 胡蘿蔔 § 植物細胞培養的種類 B.懸浮細胞 (suspension cell)培養 細胞與液態培養基充分接觸，因此除了提供一個良好的實驗體系 外，同時為植物細胞的大規模培養提供前期的技術基礎。 synchronize § 植物細胞培養的種類 C.體胚（ somatic embryo ）培養 在離體培養下沒有經過授精過程所形成胚的類似物—體胚或胚狀體 文心蘭擬原球體 胡蘿蔔 文心蘭 (protocorm-like body, PLBs) § 植物細胞培養的種類 D.器官（ organ ）培養 生長素(auxin)與細胞分裂素(cytokinin)的比率影響癒創組織的分化 § 植物細胞培養的種類 E.花藥（anther ）培養與花粉（pollen ）培養 即孤雄生殖（ androgenesis ），可以迅速獲得純系植物 § 植物細胞培養的種類 F.原生質體（ protoplast ）培養 去除細胞壁的裸露球形細胞，更方便進行細胞膜生理生化及細胞壁再生機 制等研究，甚至利用原生體融合得到屬間體細胞雜種（somatic hybrid ） 菸草葉片 杜鵑花瓣 利用原生質體融合獲得的屬間體細胞雜種 Pomato / Topato §植物細胞培養的型式 A.固態培養：試管、培養皿、三角瓶等玻璃或塑膠容器 §植物細胞培養的型式 B.液態培養：三角瓶