酶工程 第三节 酶活性调节方式.pptVIP

第三节 酶活性调节方式 酶活性调节的实例： 凝血酶、胰蛋白酶激活  糖元磷酸化酶活性转化  母体分娩后母乳中乳糖合成  丙二酸抑制琥珀酸脱氢酶活性  苏氨酸到异亮氨酸的代谢途径控制 说明了—— 正常情况下生物体并不要求每个酶处于最有效的催化状态，而是要求有快有慢。 在长期的进化、选择过程中，生物体为适应外界环境变化，满足生理功能的需要，形成了一整套调节机制。（酶合成水平上的调节和酶结构活性水平上的调节) 1. 调节酶在细胞内的浓度 如：大肠杆菌的葡萄糖效应，即在有葡萄 糖存在时，它不利用乳糖。原理可以 用乳糖操纵子模型来解释。 2. 生理调节或激素调节 在特殊生理条件下，分泌某一种激素来调节酶的活性。如：乳腺组织中的乳糖合成酶。 乳糖合成酶是蛋白A和蛋白B两组分构成的复合物，可以催化乳糖合成反应： 3、共价修饰调节 不可逆共价调节——酶原激活 ◆一些酶（主要是消化酶和执行防御功能的酶）在细胞内以无活性前体形式（即酶原）合成和分泌，然后输送到胞内外作用部位去，当功能需要时就会被活化而起作用。可以想象，必须有一种调控机制，使其在胞内合成时处于失活状态，而在需要时激活； ◆在酶原激活过程中，酶原分子结构发生了这样的变化： 首先，酶原分子被切去若干小段，即发生一级结构变化、 一级结构变化引起酶分子活性部位构象变化，形成能与 特异性底物相结合的完整的疏水口袋。 消化系统其它蛋白水解酶原的激活 胃蛋白酶原（pepsinogen） 由胃壁细胞分泌出来，在胃酸H+作用下，低于pH5时，酶原自动激活，失去44个氨基酸残基，转变为高度酸性的，有活性的胃蛋白酶 胰蛋白酶原（trypsinogen） 进入小肠后，在有Ca2+的环境中受到肠激酶的激活，赖氨酸-异亮氨酸之间的肽键被打断，水解失去一个6肽，使构象发生一定变化后，成为有活性的胰蛋白酶 羧肽酶原A 弹性蛋白酶原 可逆的共价调节 由于其他的酶对其结构进行共价修饰，而使其在活性形式与非活性形式之间进行互变. 第一种类型是磷酸化酶及其他的一些酶，它们通过接受ATP转来的磷酸基的共价修饰，或脱下磷酸基，来调节酶活性： 酶的无活性形式 酶的有活性形式 最典型的例子是动物组织中的糖原磷酸化酶： （葡萄糖）n+ Pi （ 葡萄糖）n-1+ 1-磷酸-葡萄糖 糖原磷酸化酶的活性形式及非活性形式间的平衡，是磷酸基共价地结合到酶上或从酶上脱下，从而控制调节磷酸化酶的活性 糖原磷酸化酶及其他受共价修饰调节的调节酶可以将化学信号极大的放大。 如一分子磷酸化酶的激酶可以催化几千个无活性的磷酸化酶b分子变为有活性的磷酸化酶a，从而催化糖原形成几千个分子的1-磷酸葡萄糖，这就形成了具有两步的级联放大（amplification cascade）实际上这两个酶是肾上腺素激素分子化学信号造成组织中糖原急剧分解的一个更长的级联放大中的一部分.见图 第二种类型是大肠杆菌谷氨酰胺合成酶及其他一些酶，它们受ATP转来的酰苷酰基的共价修饰，或酶促脱酰苷酰基，而调节酶活性： 酶的活性较高形式 酶的活性较低形式 谷氨酰胺合成酶催化下列反应： ATP + 谷氨酸 + NH3 ADP + 谷氨酰胺 + Pi 它有12个亚基，酰苷酰基从ATP脱下后连接到每一个亚基的专一性酪氨酸残基上，产生低活性形式的酪氨酸酚羟基的酰苷酰衍生物 4. 抑制剂的调节 凡引起酶分子一级结构破坏而使酶活力丧失称为水解 凡因酶蛋白分子构象改变而引起酶活力丧失的作用称为变性作用 某些物质，它们并不引起酶蛋白变性或水解，但能使酶分子活性中心上的某些必需基团位置发生变化，因而引起酶活力下降，甚至丧失，致使酶反应速度降低——酶的抑制 抑制---是指抑制剂与酶结合改变了酶活性部位构象性质， 从而引起酶活力下降的一种效应。 抑制作用的类型 不可逆抑制作用的分类 专一性的不可逆抑制 ▲ 仅仅和活性部位的有关基团反应（如DFP） ▲ 在研究酶的结构与功能上有重要意义，常用以确定酶的必需基团，用来探测酶的构象。 非专一性的不可逆抑制 ▲ 也能与活性部位以外的基团反应（如烷化硫基的碘代乙酸） 实际效应是减低系统中酶的有效浓度。 （这种区别不是绝对的，因作用条