第03章酶04lb.pptVIP

三、同工酶(isoenzyme) 催化相同的化学反应,酶蛋白的分子结构、理化性质乃至免疫学性质不同的一组酶 一、酶促反应的特点 2.邻近效应与定向排列使诸底物正确定位于酶的活性中心 酶促反应动力学: 概念 研究各种因素对酶促反应速率的影 响，并加以定量的阐述 (一)米－曼氏方程式 (二)Km与Vm的意义 二、 酶浓度对反应速率的影响 三、温度对反应速率的影响 四、pH对反应速率的影响 五、抑制剂对反应速率的影响 可逆性抑制作用 （reversible inhibition) （一）不可逆性抑制作用 （二）可逆性抑制作用 1.竞争性抑制作用 2.非竞争性抑制作用 3.反竞争性抑制作用 六、激活剂对反应速率的影响 非必需激活剂 变构效应剂 双倒数作图法 米氏方程两边取倒数： · 1 V = Km Vm 1 [S] + Vm 1 V= Vm [S] Km+[S] 1 V = Km+[S] Vm [S] 0 V 1 Km 1 [S] 1 Km Vm 斜率= 1 Vm (三) Km值和Vm值的测定 [S][E]时, V=k3 [E] 酶浓度对反应速率的影响 V [E] 0 最适温度: 酶促反应速率最快时的环境温度 最适pH: 酶促反应速率最快时的环境pH 1.概念：凡能使酶的催化活性下降而不引起酶蛋白变性的物质，称为抑制剂 2.类型： 不可逆性抑制作用 （irreversible inhibition) 1. 概念 抑制剂通常以共价键与酶活性中心上的必需基团相结合，使酶失活 (不能用透析、超滤等方法除去) 2. 举例 (1)有机磷化合物 胆碱酯酶 + HO E + HX P RO R’O O X P RO R’O O O E 解磷定 PAM 解毒：二巯基丙醇（BAL） (2)重金属离子 如Hg2+、Ag+、As3+等 抑制剂通常以非共价键与酶或酶－底物复合物可逆性结合，使酶活性降低或消失 概念 类型 竞争性抑制作用 非竞争性抑制作用 反竞争性抑制作用 抑制剂与酶的底物结构相似，可与底物竞争酶的活性中心，阻碍酶与底物结合形成中间产物 E + S ES E + P + I EI Ki 抑制程度取决于： 抑制剂与酶的相对亲和力与底物浓度的相对比例 底物、竞争性抑制剂与酶的结合部位 0 [s] 1 v 1 [I] 无抑制剂 Km 1 Km Vm [I] Km(1+ Ki ) 1 Km Vm (1+ Ki [I] ) 竞争性抑制 Vm 1 Vm不变 表观Km↑ 特点 (2)抑制程度取决于抑制剂与酶的相对 亲和力及与底物浓度的相对比例 (1)I与S结构类似，竞争酶的活性中心 (3) Vmax不变，表观Km增大 实例 H2N COOH H2N SO2NHR 对氨基苯甲酸 磺胺类药物 四氢叶酸 二氢叶酸合成酶 二氢叶酸 对氨基苯甲酸 四氢叶酸还原酶 (合成核苷酸) 抑制剂与酶活性中心外的必需基团结合,底物与抑制剂之间无竞争关系,但酶-底物-抑制剂复合物（ESI）不能进一步释放出产物 I E + S ES E + P + ESI Ki + EI Ki + S I 非竞争性抑制剂与酶的结合部位 0 [s] 1 v 1 Km 1 Vm 1 无抑制剂 非竞争性抑制 [I] Vmax↓ Km不变 Vm (1+ Ki [I] ) 特点 (1)抑制剂与酶活性中心外必需基团结合，底物与抑制剂之间无竞争关系 (2)抑制程度取决于抑制剂的浓度 (3)Vmax降低，表观Km不变 E + S ES E + P + I ESI Ki 抑制剂仅与酶和底物形成的ES结合，使ES的量下降。既减少从ES转化为产物的量，也同时减少从ES解离出E和S的量 反竞争性抑制剂与酶的结合部位 Uncompetitive inhibitor 反竞争性抑制 0 [s] 1 v 1 Km 1 Vm 1 无抑制剂 [I] Vmax ↓ Km↓ Vm (1+ Ki [I] ) Km [I] Ki ) (1+ 特点 (1)抑制剂只与酶－底物复合物结合 (2)抑制程度取决于抑制剂浓度和底物浓度的相对比例 (3)Vmax降低，表观Km降低 三种可逆性抑制作用的比较 反竞争性 抑制 竞争性 抑制 非竞争性 抑制 无抑制剂 E 与I结合 的组分 表观Km 最大速率 Km Vm 不变 增大 减小 减小 不变 减小 E、ES ES 竞交Y，非交X，反平行 概念 使酶由无活性变为有活性，或使酶活性增加的物质称为酶的激活剂 可提高酶的催化活性 种类