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第四章 基因精细结构的遗传分析 基因是一个特定的DNA或RNA片段,但并非一段DNA或RNA都是基因。 第一节 基因的概念 一、基因概念的发展 (一)遗传“因子”:孟德尔认为,生物性状的遗传由遗传因子所控制,性状本身不遗传。 (二)染色体是基因的载体:摩尔根实验证明基因位于染色体上,并呈直线排列,提出了遗传学是连锁交换规律,建立了遗传的染色体学说,为细胞遗传学奠定了重要基础。并由此提出基因既是一个功能单位,是一个突变单位,也是一个交换单位的“三位一体”概念。 ∴ 经典遗传学认为:基因是一个最小的单位,不能分割;既是结构单位,又是功能单位。 二、基因的类别及其相互关系 根据基因的功能和性质,可将其分为以下几类: (一)结构基因(structural gene)和调节基因(regulatory gene):既可转录又可翻译。 (二)核糖体RNA基因(rRNA基因简称rDNA)和转移RNA基因(tRNA基因简称tDNA ):只可转录不可翻译。前者专门转录rRNA, rRNA与响应蛋白质结合形成核糖体;后者专门转录tRNA, tRNA作用是激活氨基酸。 (三)启动子(promotor0和操纵基因(operator):既无转录功能又无翻译功能,确切说,它们不能称为基因。 大肠杆菌生长在无乳糖的培养基上时,每个细胞中含分解乳糖的酶,如β-半乳糖苷酶的分子还不到5个,一旦加入乳糖后2-3分钟,每个细胞中的β-半乳糖苷酶的含量可增加上千倍,每个细胞约含该酶分子5000个,而这时若将乳糖去掉,那么,2-3分钟后,细胞中的β-半乳糖苷酶的含量又恢复到初始水平。可见,乳糖能诱导相应的酶大量合成,因此,这种底物称为诱导物(inducer),相应的酶称为诱导酶(inducible enzyme)。 1961年,法国分子生物学家F.Jacob和J.Monod通过不同的大肠杆菌乳糖代谢突变体来研究基因的作用,从而提出操纵子学说(operon theory),1965年获诺贝尔奖。 一个操纵子(operon)除了同一个转录单位的结构基因(structure gene)外,还有直接参加其转录调控的DNA序列。lacO , lacP,即乳糖操纵子由5个紧密连锁,但功能不同的DNA区段组成。 (1)结构基因z :β- 半乳糖苷酶基因→ 酶催化 乳糖→半乳糖+葡萄糖。 (2)结构基因y :β- 半乳糖苷透性酶基因→ 膜结合蛋白,使乳糖进入细胞。 (3)结构基因a :编码β- 半乳糖转乙酰基酶,该酶可将一个乙酰基从乙酰辅酶A转移至β- 半 乳糖上,其在乳糖利用上的生物学意义尚不清楚。 (4)启动基因P :是RNA多聚酶与DNA结合的启始部位。(initiator) (5)操纵基因O :是阻遏蛋白结合的部位,它的功能象一个开关。(operator) 调节基因i 产生阻遏蛋白,调节结构基因的活性,与(1)-(5)不相邻。(regulatory gene) 调节基因i 产生阻遏蛋白,调节结构基因的活性,与(1)-(5)不相邻。(regulatory gene) 操纵基因与由它操纵的几个结构基因连锁在一起,几个结构基因由一个启动子转录成为一个mRNA分子,然后翻译成几种蛋白质,这样的结构成为一个操纵子(operon)。调节基因通过产生阻遏物来调节操纵基因,进而控制结构基因的功能。这样,这些基因构成了一整套基因功能的调节控制系统。 调节基因和操纵基因都有控制结构基因的作用,它们的差别是:(1)调节基因可以调节不同染色体上的结构基因,而操纵基因则只是操纵同一染色体上的结构基因。(2)后者无基因产物。 操纵子模型进一步丰富了基因概念。 三、基因与DNA 一个基因大约有500-6000个核苷酸对,但并非DNA分子上任一含有几千个核苷酸对的区段都是一个基因,基因是一个含有特定遗传信息的DNA分子区段。 如何判断一段核苷酸序列是否是某个基因? 要看这个特定的核苷酸序列是否与其转录产物RNA核苷酸序列或翻译产物多肽链的氨基酸序列相对应,这样就必须同时测定某一段DNA的核苷酸序列和相应产物的序列。 (一)基因的化学本质 1928年,Griffith首先发现了肺炎双球菌的转化现象,1944年,O.T.Avery等证实肺炎双球菌的转化因子是DNA,才首次证明基因是由DNA构成。 1953年,Watson和Crick提出了DNA的双螺旋结构模型。Crick,1957年提出“中心法则”,1961年,又提出“三联体密码”,从而阐明了DNA的结构、复制和遗传物质如何保持世代连续的问题。 从化学本质上看基因是含有特定遗传信息的DNA分子片断,每个基因平均相当于1000(500-6000)对核苷酸的特定序列。估计大肠杆菌含有1000~7500个基因,人
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