响应曲面法优化低次烟叶可溶性蛋白提取工艺.pdfVIP

一 235 一 江苏农业科学 2013 年第41 卷第2 期 董二慧，谭 红，何锦林，等.响应曲面法优化低次烟叶可溶性蛋白提取工艺[J].江苏农业科学，2013 ,41 (2) :235 - 238. 响应曲面法优化低次烟叶可溶性蛋白提取工艺 董二恙1 ，2 ，浮红2 ，何锦林2 ，袁鑫12 ，马凯1 气赵红波1 ， 2 (1.贵州大学化学与化工学院，贵州贵阳 550002; 2. 贵州理化测试分析研究中心，贵州贵阳 55创脱) 摘要:为了研究低次烟草中蛋白质的优化提取工艺，在单因素试验的基础上，选择提取缓冲溶液的浓度、液料比 利 pH 值为自变量，以蛋白质的提取率为响应值，采用 Box - Behnken 试验设计方法，研究各自及其交互作用对烟草蛋 白质提取率的影响。利用响应面回归分析方法对提取条件进行优化得到的最佳工艺变量条件为:缓冲榕液的浓度 O. 仰 moνL、提取液与烟草的液料比 10 mVg、pH 值7.48 ，在此条件下，烟草蛋白质的提取率为10.96 吨倍。 关键词:烟草蛋白质;响应曲面法:优化;提取工艺 中圄分类号:τS41. 1 文献标志码:A 文章编号:1∞12 -1302 (2013 ) 02 - 0235 - 03 烟草(NictiaTω tabacum L. )是一年生茄科烟草属草本植 湘仪离心机仪器有限公司) ，而 -1 型冷冻干燥机(北京博医 物[1] ，有 ω余种。烟草中含有大量的有用物质问，其中以蛋 康试验仪器)。 白质含量最为丰富，如白肋烟中蛋白质含量高达20.489串 [3] 。 1. 2 试验方法 由于世界人口不断增加，许多地区的人们均有营养不良现象， 1. 2.1 单元操作 烟叶蛋白质的提取流程如图 1 所示。 因此，如何在经济的原则下生产大量可食性蛋白是目前发展 的主要方向。随着对蛋白质研究的不断深入，人们逐渐认识 到叶蛋白是世界天然产物中最重要且丰富的蛋白质资源，尤 其是烟草叶中，有研究显示，烟草蛋白质与其他蛋白质相比具 有较高的营养价值和药用价值[4] ，并逐步应用到饲料和食品 领域中[S -7] 。从烟草中提取天然蛋白质是废次烟叶综合利用 的重要途径，具有显著的社会、经济和生态效益[刑。本试验 提取缓冲溶液 以低次烟叶为原料，考察不同的提取缓冲溶液，采用响应面法 优化提取工艺过程参数，为低次烟叶资源的综合开发利用提 供理论参考。 1 材料与方法 1. 1 材料及设备 低次烟叶，贵州产。整片的晒干烟叶去除叶脉、叶梗，切 碎后用粉碎机粉碎，过筛，备用。磷酸、磷酸二氢铺、磷酸氢二 圄1 烟叶蛋白质提取的流程 铺、磷酸二氢钢、乙酸、乙酸铀、无水乙酶，均为分析纯。牛血 清蛋白进口分装(上海源叶生物科技有限公司) ，考马斯亮蓝 1. 2. 2 烟草蛋白质的提取 干烟叶去除叶脉、叶梗，经粉碎 G250 进口分装(北京寰宇科创生物科技发展有限公司)。 机粉碎，过筛，称适当重量的烟粉于烧杯中，加入适当比例的 紫外-可见分光光度计(Agilent8453 UV - Vis) ，精密 pH 提取缓冲溶液，经搅拌机搅拌混匀，在4 C、48∞ r/min 条件 计(PHS - 3C 型，上海精密科学仪器有限公司) ，粉碎机 下离心 10 min 进行分离，收集上清液，备用。所有提取试验 (XS -20B多功能粉碎