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细胞技术 微生物学与免疫学教研室 免疫学与分子生物学研究所 胡为民 细胞技术 细胞培养 一、基本概念 原代培养 取自体内新鲜组织并置于体外条件下生长的细胞在传代之前称为原代培养。 传代 细胞在培养器皿中生长一定时间后，被分开接种到新的培养器皿中。 基本知识 细胞培养：使用单个细胞悬液 组织培养：使用组织块（0.5～1立方毫米）或薄片（厚0.2 毫米） 器官培养：使用器官原基或器官的一部分或整个器官 二、原代培养细胞的生命归宿 原代培养期 传代期 衰退期 有限细胞系：不能连续传代或传代数有限。 无限细胞系：可连续传代。 细胞系（cell line）：原代培养经首次传代成功即为细胞系，由原先存在于原代培养物中的细胞世系所组成。 细胞株（cell strain ）：通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或细胞标志物称为细胞株。 三、培养细胞的特性 （一）培养细胞的生长方式 贴附生长：必须贴附于支持物表面才能生长。见于各种实体瘤细胞。 悬浮生长：于悬浮状态下即可生长，不需要贴附于支持物表面。见于各种造血系统肿瘤细胞。 （二）每代贴附生长细胞的生长过程 游离期 贴壁期 潜伏期 对数生长期 停止期（平台期） 1、游离期： 细胞接种后在培养液中呈悬浮状态，也称悬浮期。此时细胞质回缩，胞体呈圆球形。 10