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微生物的纯培养和显微技术1
第二章 微生物的纯培养 和显微技术 * 微生物的基本特点: 小 在绝大多数情况下都是利用微生物的群体 来研究其属性; 微生物的物种(菌株)一般也是以群体的 形式进行繁衍、保存; 培养技术在微生物学中具有重要意义! 在研究中所使用的微生物培养群体: 培养物:在一定的条件下培养、繁殖得到的 微生物群体 混合培养物:含有多种微生物的培养物; 纯培养物:只有一种微生物的培养物; 通常情况下只有纯培养物才能提供可以 重复的结果 纯培养技术是进行微生物学研究的基础! 微生物个体微小的特点也决定了显微技术是进行微生物研究的另一项重要技术,因为绝大多数微生物的个体形态及其内部结构只能通过显微镜才能进行观察和研究. 微生物的基本特点: 小 第一节 微生物的分离和纯培养 从混杂的群体中分离特定的某一种微生物,是研究和利用微生物的第一步。 一、无菌技术 用于分离、培养微生物的器具事先不含任 何微生物; 在转接、培养微生物时防止其它微生物的 污染; 1、微生物培养的常用器具及其灭菌 常用的器具: 试管、瓶子、培养皿等 高温干热灭菌 高压蒸汽灭菌 试管、瓶子、培养皿等 常用的灭菌方法: 1、微生物培养的常用器具及其灭菌 常用的器具: 2、接种操作 无菌操作: 火焰附近(酒精灯、煤气灯)进行 2、接种操作 无菌操作: 在无菌箱或操作室内无菌的环境 下进行 二、用固体培养基分离纯培养 培养基: 液体培养基; 固体培养基; 半固体培养基; 二、用固体培养基分离纯培养 培养基 液体培养基; 固体培养基; 半固体培养基; 琼脂 二、用固体培养基分离纯培养 菌落(colony): 单个(或聚集在一起的一团)微生物在适 宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖到一定 程度可以形成肉眼可见的、 有一定形态结构 的子细胞生长群体. 众多菌落连成一片 菌苔(lawn) 不同微生物在特定培养基上生长形成的菌落 或菌苔一般都具有稳定的特征(形状、颜色 等),可以成为对该微生物进行分类、鉴定 的重要依据(见P15 图2-3)。 (P15 图 2-3) 同一细菌在不同的培养平板上形成 不同的特征菌落 二、用固体培养基分离纯培养 使微生物在固体培养基平板上形成 单个菌落的基本方法: 稀释 二、用固体培养基分离纯培养 2、稀释倒平板法 1、涂布平板法 操作较麻烦,对好 氧菌、热敏感菌 效果不好 使用较多的常规方法,但有时涂布不均匀 二、用固体培养基分离纯培养 3、平板划线法 二、用固体培养基分离纯培养 4、厌氧微生物的分离 厌氧罐 厌氧手套箱 *
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