神经培养技术12090714.pptVIP

神经培养技术;简 介;萌芽：1885年德国学者Roux将鸡胚的神经板放入生理盐水中，发现神经板在盐水内存活数天。 起步：1907年，Harrison首次成功地用蛙淋巴液培养了蛙胚神经组织，并观察到神经细胞突起的生长过程。 ;发展：在设备、条件和方法上不断改进，尤其是自二战结束后，进入了新的飞速发展的阶段。;人类神经系统被公认为是自然界最复杂的系统。神经科学（neuroscience）已成为当今人类医学和生命科学的前沿。 多个学科、多个研究领域所进行的研究，均能以神经培养作为研究手段之一。;一、按培养物的整体性及大小分类; 可直接按培养的对象命名：如小脑培养，神经节培养，星形胶质细胞培养，少突胶质细胞培养，雪旺细胞培养等。; 静置培养：载片式、试管式、培养瓶式等。 旋转管培养：不断缓慢转动，以便经常更动培养液与培养物的关系。; 原代培养（primary culture）：神经细胞一般不再分裂，不传代，故属原代培养。 再培养（sub-culture）：把培养物切、割、取、弃等修改后，换培养液后再继续培养。 联合培养（coculture）：把两种或两种以上的组织放在一起进行培养。;四、其它; 一、 无污染环境 二、 温度 37℃ 三、 气体环境和氢离子浓度 95%空气和5%二氧化碳 pH值为7.2~7.4;葡萄糖：较高。 氨基酸 维生素 促生长因子 神经生长因子（NGF） 其它 ;半固体培养基 液体培养基 ①天然培养基（natural medium） ②合成培养基（synthetic medium） ③无血清培养基（serum free medium） ; ①玻璃 ①多聚赖氨酸覆着底物 ②一次性塑料 ②细胞外基质成分 ③细胞粘附分子 ④单层非神经元细胞;神经培养的基本实验设备;二、实验室设备;三、器械四、培养器皿;;培养用液; 一、水和平衡盐溶液;几种常用平衡盐溶液的组成成分（g/L）; 1. 血清 牛血清 成年牛血清 新生牛血清 胎牛血清 马血清 羊血清;;液体培养基、粉制培养基 BEM：Basal Eagle Medium 基础Eagle培养基 MEM：Minimum Eagle Medium 低限量 Eagle培养基 DMEM：Dulbecco’s Modified Eagle Medium Dulbecco改良Eagle培养基 IMEM：Iscove Modified Eagle Medium Iscove改良Eagle培养基; 四、无血清培养基;; 全培液; 其它常用溶液; ;;;;;神经培养的基本技术程序;培养前准备;取材;;;;标本维持;观察记录;;新生大鼠基底神经节神经元的分散培养;;