血液一般检验技术、血红蛋白测定要领.ppt

实验一 血液的一般检验技术 主讲：王翠霞 【目的】 1、掌握皮肤采血法，了解不同部位采血对结果的影响。 2、掌握微量吸管的使用方法 3、掌握改良牛鲍氏计数板的使用 4、血涂片的制备 血液的一般检验技术内容 1、皮肤采血法 2、微量吸管的使用 3、牛鲍氏计数板的使用 4、血涂片的制备 【器材】 ①一次性消毒采血针 ②一次性微量吸管、胶吸头 ③75％乙醇、脱脂棉球等 【操作】 1、准备材料。 2、选择采血部位。 3、按摩、消毒、针刺皮肤。 4、取第一滴血制血涂片。 5、用毛细血管采血、止血 6、稀释血液 二、血红蛋白测定 【目的】 掌握氰化高铁血红蛋白测定方法的原理及操作 【原理】 血液（SHb除外） 【器材】 ①采血用具 ②试管、试管架 ③分光光度计等 【试剂】 HiCN转化液 常用文齐液 【操作】 计算 Hb（g/L）=A×64458×251 ＝ A ×367.7 【注意事项】 1、器材要干净、干燥 2、采血深度要适当 3、HiCN转化液中含有毒物，注意防止污染 【参考值】 男性：131～172g/L 女性：113～ 151g/L 新生儿：180～ 190g/L * * 毛细血管采血法 采血部位：手指或耳垂 采血器材：三棱针或专用“采血针” 注意事项：一人一针制、忌挤压等 采血前用75％酒精棉球消毒人的指腹 采血 弃去第一滴血 改良牛鲍计数盘的使用原理 一定倍数稀释的血液或体液，混匀后滴入具有固定体积和精密划分刻度的血细胞计数盘中，在显微镜下对所选择区域中的细胞进行计数，再乘以稀释倍数，即可换算成单位体积内的细胞数。 1. 采血部位的皮肤应完整，严格无菌操 作，防止采血部位感染 2. 拭去第1滴血；吸血量准确 3. 保证计数板和盖玻片清洁并符合标准 4. 一次完成充池，静置计数板2～3min 5. 压线细胞按照数上不数下，数左不数右 的原则 6. HiCN转化液中氰化钾是剧毒品，配制 转化液时要按剧毒品管理程序操作 注意事项 改良Neubauer计数盘结构 0.005mm 1.0mm R R R R R W W W W E E E E E 0.005mm 1/20mm 1/5 mm 上页 下页 改良Neubauer计数盘结构 计数室 计数室 正面观： 计数室 支柱 支柱 侧面观： 盖片 改良Neubauer计数盘结构 计数室 计数室 正面观： 计数室 支柱 支柱 侧面观： 盖片 上页 下页 改良Neubauer计数盘结构 0.005mm 1.0mm R R R R R W W W W E E E E E 0.005mm 1/20mm 1/5 mm 录象 返回 推片：挤出一滴血置于载玻片的右侧1/4处 再取另一张边缘光滑的双凹片，斜置于血滴的前缘，先向后稍移动轻轻触及血滴，使血液沿玻片端展开成线状。 30~45° 两玻片的角度以30~45°为宜，轻轻将双凹 片向前匀速推进，即涂成血液薄膜。 转化液 ＋ Fe2＋ Fe3＋ HiCN稳定的棕红色 换算成每升血液中的血红蛋白浓度 CN－ 高铁氰化钾 Hi ＋ 吸收波峰在540nm，测定该处吸光度 5ml转化液 加血20μL 静置5min 540nm比色 计算 44000 *