抗草甘膦转基因玉米的培育.PDFVIP

Online system: 农 业 生 物 技 术 学 报 Journal of Agricultural Biotechnology 2015, 23(1): 52~60 DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2015.01.006 抗亚洲玉米螟、抗草甘膦转 因玉米的培育 1 1 2 1 1* 孙越 刘秀霞 李丽莉 官赟赟 张举仁 1 山东大学生命科学学院，济南250100 ；2 山东省农业科学院植物保护研究所，济南250100 *通讯作者，jrzhang@ 要 5-烯醇式丙酮酸莽草酸-3-磷酸合酶基因(5-enolpyruvyl-shikimate-3-phosphate synthase, epsps)是 一个高抗草甘膦的 因，苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis) 的杀虫蛋白基因(Bt 基因)cry 1AcM 是一个能 在单子叶植物中高效表达的抗亚洲玉米螟基因。为了获得具有抗虫、抗除草剂优良复合性状的转 因玉 米，本研究构建出质粒pCAMBIA 1302-P35S::epsps-Tnos-Pubi::cry 1AcM-Tnos，通过农杆菌(Agrobacterium tumefacien)介导的玉米(Zea mays)茎尖遗传转化法将目标基因转入玉米。通过分子检测、草甘膦抗性筛选 和田间接种亚洲玉米螟(Ostrinia furnacalis (Guen e))试验筛选出转基因株系，在此 础上进行了转 因植 株室内抗亚洲玉米螟试验和田间草甘膦抗性分析，并采用RT-PCR 检测和Western blot 方法确定了抗虫蛋白 在转基因植株中稳定表达。从大量转基因株系中优选出6 个遗传稳定且抗亚洲玉米螟、抗除草剂草甘膦的 转 因玉米株系，这些株系的抗亚洲玉米螟、抗草甘膦特性完全满足大田应用的需求。综上所述，将改造后 的Bt 抗虫基因cry 1AcM 和抗草甘膦基因epsps 一同转入玉米，赋予两种玉米骨干自交系植株抗玉米螟、抗草 甘膦特性，为 国抗亚洲玉米螟抗草甘膦转 因玉米的大面积推广培育出了优良自交系。 关键词 5-烯醇丙酮酸莽草酸-3-磷酸合酶基因(epsps) ，Bt cry 1AcM 因，转 因玉米，抗亚洲玉米螟，抗草 甘膦，稳定遗传 Breeding of Transgenic Maize with Resistance to the Asian Corn Borer (Ostrinia furnacalis) and Tolerance to Glyphosate SUN Yue1 LIU Xiu-Xia1 LI Li-Li2 GUAN Yun-Yun 1 ZHANG Ju-Ren1* 1 School of Life Science, Shandong University, Jinan 250100, China; 2 Institute of Plant Protection, Shandong Academy of Agricultural Sciences, Jinan 250100, China *Corressponding author, jrzh ang@ Abstract 5- enolpyruvyl- shikimate- 3- phosphate synthase ( epsps) is a new gene of high resistance to glyphosate and Bt cry 1AcM as an insect-resistent gene can expresse at high level in monocotyledon. In order to breed transgenic maize with stacking traits of insect-resistance and glyphosate-tolerance, the plant expression vector