合浦珠母贝3个养殖群体的RAPD分析.PDF

维普资讯 第9卷第 2期 中 国 水 产 科 学 VOI．9 NO．2 2002年 6月 JournalofFisherySciencesofChina Jun．，2002 合浦珠母贝3个养殖群体的RAPD分析 苏天凤 ，蔡云川2，张殿昌3，江世贵 (1．q-国水产科学研究院 南海水产研究所，广东广州 510300； 2．华中农业大学 水产学院，湖北 武汉 430070；3．中山大学 生命科学学院，广东 广州510275) 摘 要：利用RAPD标记技术检测了广西省北海市、海南省三亚市、广东省深圳市等 3个地理种群养殖合浦珠母贝 (Pim d“ “rtensii)基因组 DNA的多态性，并对其遗传结构进行了初步分析。从40个随机引物 中筛选出 13个 10bp引物，它们在 3种群 中共扩增 出了 140条 DNA片段 ，3种群共有片段 16条 ，DNA片段数分别为 58、91和 71 条，多态性位点比例分别为41．4％，65．0％和 58．4％?遗传距离分析表明，广西种群与广东种群的亲缘关系较近， 而与海南种群亲缘关系较远：13个引物中，引物 s，，和 s 扩增出的3种群指纹图谱差异显著，可作为3种群鉴定 的分子标记 关键词：合浦珠母贝；养殖种群；RAPD；分子标记：遗传多样性 中图分类号：Q959．215；Q78 文献标识码：A 文章编号 ：1005—8737(2002)02 0106—04 合浦珠母 贝(Pinctadamartensii)是我 国生产 取回后活体置超低温冰箱 一72℃保存备用。每 1 海水珍珠主要的母 贝_lJ，由于多年的人工繁殖生 群体随机抽取 6只提取基因组DNA用于分析。 产，出现了个体小型化、抗病能力差、育珠质量低等 1．1．2 试剂 琼胶和DNA标记为宝生物工程大 种质退化现象，其品种亟待改 良[l3]。本研究利用 连有限公司产品，其他分子生物学试剂均为上海生 RAPD技术对 3个不同地理种群 的养殖合浦珠母 贝 工公司产品。 基因组DNA进行 了遗传分析，并对其种群结构进 行了初步研究。 目前国内在海洋生物种群遗传结构 的研究方面只有刘必谦等[、宋林生等[，]对大连 湾牡蛎、对虾作过初步研究，王爱民等_7]在早期对 合浦珠母贝的天然群体遗传多样性进行了研究。本 实验对 3种养殖种群 的合浦珠母 贝进行 RAPD研 究，以期探索在分子水平上进行种质鉴定、品种改 良 及种质资源保护的理论依据。 l 材料和方法 1．1 材料与试剂 1．1．1 合浦珠母贝 分别取 自广西北海、海南三 亚、广东深圳的珍珠养殖场。其地理分布见图 1。 收稿 日期：2001—06—08． 基金项 目：中国水产科学研究院基金资助(99—08—01)． 作者简介 ：苏天风(1969一)，女，助理研究员、从事渔业生物技术 图 l 采样地点 通讯作者：江世贵 ． Fig．1 Samplingsites 维普资讯 第 2期 苏天凤等：合浦珠母贝3个养殖群体的RAPD分析 107 1。2 实验方法 1．3 数据分析 1。2。1 基因组 DNA的提取 取 一72℃的贝稍融， 根据 Apostol等[]假设，将 RAPD标记作为等 撬开贝壳．用干净解剖刀切取闭壳肌，尽量避开外套 位基因进行多态分析，多态位点比例 P=多态扩增 膜组织，加液氮研磨至粉末，称 1g粉末加入 10ml 片段 ／扩增片段总数