细胞生物学进展09.3课件.pptVIP

黄冈师范学院生科院 现代生物学教研室 杨谷良 2009年3月 第一章 绪论 一、细胞的发现 1665年，R.Hooke发表了《显微图谱》一书，描述了用自制显微镜（30倍）观察软木塞切片时发现的“cellar”. 1674年，荷兰布商列文虎克自制了高倍显微镜（300倍），观察到血细胞、池糖水滴中的原生动物、人类和其它哺乳动物的精子。 二、细胞学说的建立 第一阶段：1838-1839年，德国植物学家施莱登和德国动物学家施旺两人共同提出细胞学说：一切动植物都是由细胞构成的，细胞是一切动植物的基本单位。 第二阶段：新的细胞可以通过老的细胞繁殖产生。1858年，魏尔肖指出细胞只能来源于细胞。进一步指明细胞是一个相对独立的单位。 三、细胞学的经典时期： 主要细胞器和细胞分裂活动的发现。 四、实验细胞学时期： O.Hertwig采用实验方法研究海胆和蛔虫卵发育中的核质关系，创立了实验细胞学。 五、细胞生物学学科的形成与发展 20世纪50-60年代：生物化学与细胞生物学的相互渗透与结合。 20世纪70年代：分子生物学概念引入到细胞学 20世纪80年代：细胞生物学的主要发展方向为分子细胞生物学。 问答题： 简述细胞学说的建立过程及主要内容，并说明为什么说细胞学说的真正完善是1858年。 第二章 细胞的统一性与多样性 一、支原体 最小、最简单的细胞，具备了细胞的基本形态结构，并具有人微言轻生命活动基本单位存在的主要特征。 具有细胞生存所需要的最低数量的蛋白（700多种）。 以一分为二的方式进行繁殖。维持细胞基本生命活动细胞的最小极限不可能小于100nm，支原体己接近该极限。 二、原核细胞的两个代表：细菌与蓝藻 1.细菌：没有典型的核结构，只有类核，核区不表现Feulgen正反应。 细胞表面饮食细胞质膜、中膜体、细胞壁、荚膜、鞭毛。 其核糖体沉降系数为70S，小部分为附着核糖体，大部分为游离。 除了核区DNA外，还存在可自主复制的遗传因子（质粒） 2.蓝藻： 遗传物质的所在部位为中心质，DNA含量比原核生物大。 最简单的光能自养生物之一。仅含叶绿素a。 细胞质膜外有细胞壁和一层胶质层（又称为鞘），细胞体积较其它原核生物要大。 问答题： 为什么说支原体可能是最小最简单的细胞存在形式？ 为什么说古核细胞比细菌更有可能是真核细胞的祖先？ 简要说明抗生素的杀菌机理及细菌对抗生素的耐药性的形成过程。 讨论下面的论述：“病毒是寄生物，它们对宿主生物是有害的，使宿主生物在进化过程中处于不利的地位。” 真核生物内膜结构体系的形成有什么意义？ 判断下面的说法是否正确：“所有的生命体均由细胞构成”，并解释原因。 第三章 细胞生物学的研究方法 相差显微镜： 原理：光线通过不同密度的物质时，若密度大则光滞留的时间长，反之则短。相差显微镜正是利用这一点，将相位差转换成振幅差。 应用：样品不需要染色，可以观察活细胞，甚至细胞核、线粒体等细胞器的动态 荧光显微镜： 原理；物质中的电子吸收光能后由低能状态转变为高能状态，再加到低能状态时释放出的光就是荧光 应用：鉴定来细胞结构、对特异蛋白质等生物大分子进行定性、定位 负染色技术：构成生物体的一些分子是由一些原子序数很低的轻元素（C、H、O、N）组成的，它们散射电子的能力很弱，在电镜下几乎不形成明暗反差，为使生物样品加大反差，用重金属对其进行染色，增加散射电子的能力，从而衬托样品的精细结构。 冷冻蚀刻技术： 用快速低温冷冻法对样品迅速冷冻（液氮），并在低温下进行断裂。 用铂、金等金属进行倾斜喷镀形成对应于凹凸的电子反差，再经碳垂直于断面进行真空喷镀，形成一连续的碳膜 用消化液将样品消化，将碳膜及其构成图形的金属微粒移到载网上进行电镜观察。 电镜三维重构技术： 是电子显微镜、电子衍射技术与计算机图像处理相结合而形成的，适合于生物大分子三维结构的分析。首先，在不同倾角下对样品进行拍照，将所得到的系列图片经傅立叶变换，获得样品的三维结构电子密度图。目前，该技术与X射线衍射技术、核磁共振分析技术相结合，成为当前结构生物学的主要实验手段。 细胞内核酸、蛋白质、糖与脂质等万分的显示方法： 利用一些显色剂与被检测物质中某些基团特异性结合，通过显色剂在细胞中的定位及颜色的深浅来进行物质的定性与定量分析。 DNA：Feulgen反应 多糖：PAS反应 不饱和脂肪酸：四氧化俄 磷脂：苏丹III 蛋白质的酪氨酸：米伦 碱性磷脂酶：格莫瑞 特异蛋白抗原的定位与定性： 根据抗体能与对应抗原自行识别并结合