蛋白质的相互作用研究方法.pptVIP

GFP主要应用: 对活细胞中的蛋白质进行准确定位及动态观察 可实时原位跟踪特定蛋白在细胞生长、分裂、分化过程中或外界刺激因子的作用下的时空表达, 如某种转录因子的核转位、蛋白激酶C的膜转位等。 GFP基因与分泌蛋白基因连接后转染细胞, 可动态观察 该分泌蛋白分泌到细胞外的过程 GFP基因与定位于某一细胞器特殊蛋白基因相连,就能显示活细胞中细胞核、内质网、高尔基体、线粒体等细胞器的结构及病理过程。 膜蛋白的移动 （Fluorescence Recovery After Photobleaching FRAP ） 蛋白之间的相互作用（FRET） 报告分子 将GFP的基因连在特殊的启动子的后面，可以检测基因表达的时间和部位。 人们在GFP基因的基础上已经制造出蓝色荧光蛋白，黄色荧光蛋白，青色荧光蛋白，又发现了红色荧光蛋白。 其中兰色荧光蛋白和绿色荧光蛋白 青色荧光蛋白和黄色荧光蛋白之间可以发生荧光共振能量转移 Look at physical interactions between proteins 四、Bimolecular Fluorescent Complementation 五、Yeast Two－Hybrid Systerm 1.原理 酵母双杂交系统由F