第八章分枝杆菌属细菌检验.pptx

;第十章 分枝杆菌属、诺 卡菌属、放线菌属鉴定;本 章 内 容;学习目标及重点;第一节 分枝杆菌属;一、结核分枝菌 (一)生物学性状 1.形态与染色：G+（不易着色），细长略弯，分枝状，有荚膜，抗酸染色阳性。菌体外有荚膜 2.培养特性 营养要求较高，最适pH6.5～6.8，在罗氏（Lowenstein-Jensen，L-J）培养基上生长良好 生长缓慢，14～18h分裂1次，在固体培养基上2～5w才出现肉眼可见的菌落 典型菌落为粗糙型，表面干燥呈颗粒状，不透明，乳白色或淡黄色，如菜花样 ;结核菌抗酸染色结果;一、结核分枝菌 ３.生化反应 不发酵糖类，触酶试验阳性，而热触酶试验阴性——加热68℃散失活性（区别非结核菌） 烟酸合成试验、硝酸盐还原试验、吡嗪酰胺试验均阳性，可与牛型结核分枝菌鉴别 ４.抵抗力 对乙醇、湿热、紫外线、抗结核药物（链霉素、异烟肼、利福平等）敏感 对干燥、酸（3% HCl或6% H2SO4) 或碱（4% NaOH)、碱性染料（孔雀绿、结晶紫）、青霉素等抗生素等有抵抗力 ;一、结核分枝菌 ５.变异性 （１）形态结构变异： 结核杆菌的L型：颗粒状（Much颗粒——病灶中革兰阳性非抗酸性）、丝状 （２）毒力变异： 卡介苗(BCG)：Calmette和Guérin将牛型分枝杆菌经13年230次传代而获得的减毒菌株——活疫苗 （３）耐药性变异： 耐异烟肼及其他抗结核药物的结核菌株日益增多 ;一、结核分枝菌 （二）微生物检验 1.标本：根据感染部位的不同来采集不同的标本，最常用痰液标本 2. 标本前处理 目前有酸（4%HCl）处理和碱（4%NaOH）处理两种方法 3.检验程序 ;标本;一、结核分枝菌 4.形态学检查 （高压灭菌后进行） （1）直接涂片染色镜检 （2）浓缩集菌涂片检查法 （3）荧光染色：观察形态 黄绿色、橙色荧光 （4）初步报告：检出抗酸分枝杆菌（结核杆菌？） ;报告方式;一、结核分枝菌 5.分离培养 L-J斜面或平板：生长缓慢，涂片抗酸染色 快速培养系统：自动报告 6.核酸检测：PCR法;一、结核分枝菌 (三)临床意义 1.致病物质：主要与菌体成份有关。 （1）脂质 ;一、结核分枝菌 （2）蛋白质 诱发超敏反应 （3）糖类 抵抗吞噬作用 2.所致疾病 （1）经多途径感染，引起全身各组织结核病，以肺结核最多见 （2）类型 原发感染和继发感染 3.免疫性 抗结核免疫以细胞免疫为主 ※抗结核免疫属带菌免疫或称传染性免疫 ※抗结核免疫与Ⅳ型超敏反应同时出现;一、结核分枝菌 4.结核菌素试验 （1）原理 用结核菌素进行皮肤试验，以检测受试者对结核杆菌是否有细胞免疫及迟发型超敏反应的试验。 （2）结核菌素试剂 （PPD 5单位）旧结核菌素（old tuberculin，OT)，纯蛋白衍化物(purified protein derivative，PPD) （3）结果 48h-72h ,根据注射部位是否出现红肿判断结果 ＜5mm为阴性 ≥ 5mm为阳性 ＞15mm为强阳性 ;一、结核分枝菌 （4）结核菌素试验意义 选择卡介苗接种对象、测定卡介苗接种后的免疫效果 了解人群结核菌的自然感染率 作为婴幼儿结核病的辅助诊断 测定肿瘤患者的细胞免疫功能 ;二、麻风分枝菌 1.生物学特性 1873年挪威学者Armauer Hansen从麻风患者皮肤结节中发现，又名Hansen杆菌，具抗酸性 细胞内寄生，有麻风杆菌寄生的细胞呈泡沫状，称为麻风细胞 体外人工培养尚未成功 犰狳是动物感染模型;麻风分枝菌;二、麻风分枝菌 2.所致疾病: 传播途径：主要是密切接触 麻风：侵害皮肤、粘膜和神经系统 临床分型：（临床表现、病理特征和菌检结果） 瘤型麻风（占20%~30%，传染性强） 结核样型麻风（占60%~70%，传染性弱） 界线类综合症（占5%，可转化为以上两型） 3.防治原则：早发现（检验时，标本通常采用刮片），早隔离、早治疗，治疗药物主要有砜类（氨苯砜、苯丙砜、醋氨苯砜）、利福平、氯苯吩嗪及丙硫异烟胺;麻风“狮面”;三、非典型分枝菌 1.非典型分枝杆菌：除人型结核分枝杆菌、牛型结核分枝杆菌与麻风分枝杆菌以外的分枝杆菌菌群，也称为非结核分枝杆菌 2.致病性：多存在于自然界，为条件致病菌 3.分类：根据菌落色素和生长速度分为4组 第Ⅰ组（RunyonⅠ群）：光产色菌 第Ⅱ组（Runyon Ⅱ群）：暗产色菌 第Ⅲ组（Runyon Ⅲ群）：不产色菌 第Ⅳ组（Runyon Ⅳ群）：迅速生长菌 ;4.代表菌种 第Ⅰ组（RunyonⅠ群）：光产色菌：堪萨斯分枝杆菌、猿猴分枝杆