分解纤维素的微生物的分离.pptVIP

* 复习课题一： 1、培养基的基本成分有哪些？除了这些成分外还需要满足哪些条件？ 2、培养基的分类有哪些？ 3、应用微生物的前提是什么？举例说明几个无菌操作。 4、实验室常用的消毒方法有哪些？各需要什么样的条件? 5、实验室常用的灭菌方法有哪些？各需要什么样的条件？ 6、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基需要哪些成分？各成分提供的什么营养物质？ 7、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作过程是什么？ 8、培养基和培养皿分别采用哪种灭菌方法？各灭菌方法的条件是什么？ 9、微生物接种常用的两种方法是什么？各用的哪种接种工具？哪种方法需要稀释？哪种方法可以用来菌落计数？计的是全部菌落数还是活菌数？ 10、如何检测培养基是否灭菌合格？菌种的保藏方法有哪些？各需要接种的什么培养基上？在多少温度下保藏？ 复习课题二： 1、土壤中的细菌为什么可以将尿素分解？尿素分解以后变成了什么？它会使pH升高还是降低？可以使哪种指示剂变色？变成什么颜色？ 2、利用什么培养基可以筛选出能够分解尿素的细菌？该培养基中提供碳源和氮源的物质分别是什么？该培养基按物理状态划分属于什么培养基？ 3、统计菌落数目常用的方法有哪些？哪个用于统计全部菌落数？哪个用于统计活菌数？ 4、为保证结果准确，一般选择菌落数为多少的平板进行计数？实验统计的菌落数往往要比活菌的实际数目低还是高？为什么？ 6、为什么分离不同的微生物要选择不同的稀释度？目的是什么？第一次做实验的时候一般选用多少的稀释度？ 7、如何检测该选择培养基具有选择作用？ 一、关于纤维素 阅读P27课题背景及基础知识第一段，回答： 1、纤维素的化学本质是什么？它的基本组成单位是 什么？ 2、纤维素主要分布在哪里？ 3、自然界中纤维素含量最高的天然产物是什么？ 4、纤维素的作用是什么？ 5、地球上每年产生的纤维素超过70亿吨，为什么不会造成堆积？ 6、哪些生物能够分解纤维素？人能够分解纤维素吗？ 多糖 植物的根、茎、叶等器官以及木材、作物秸秆中 与果胶共同构成植物的细胞壁，具有支持保护功能 棉花 葡萄糖 土壤中的某些微生物可以合成纤维素酶，将纤维素分解为葡萄糖 某些微生物（细菌、真菌、放线菌）和反刍动物（食草动物） 掌握： 1、纤维素是一种多糖，它是由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物。 2、纤维素主要存在于植物的根、茎、叶等器官和木材、作物秸秆中。其中棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物。 3、土壤中的微生物能够分解纤维素是因为它们能合成纤维素酶，纤维素在纤维素酶的作用下会分解成葡萄糖。 二、关于纤维素酶 阅读P27基础知识第二段及小字部分，回答： 1、纤维素酶包括哪些组分？它们分别起什么作用？ 掌握： 纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶(内切酶)、CX酶（外切酶）和葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。 纤维二糖 C1酶、Cx酶 葡萄糖苷酶 葡萄糖 纤维素 纤维素酶分解纤维素的实验 实验过程： 甲试管：滤纸+缓冲液11mL 乙试管：滤纸+缓冲液10mL+纤维素酶1mL 实验结果： 甲试管滤纸仍在，乙试管滤纸被完全分解 思考： 1、本实验的自变量是什么？ 2、滤纸提供的是什么？ 3、乙试管的滤纸为什么会消失？甲试管的作用是什么？ 4 、甲乙两试管如何构成对照？甲试管多加的1mL缓冲液能不能换成蒸馏水？ 有无纤维素酶 纤维素 纤维素被分解 对照 乙试管有纤维素酶，甲试管没有，加入了等量的缓冲液 三、纤维素分解菌的筛选 土壤中有众多的微生物，但只有一部分能够分解纤维素，那么如何从众多的微生物中把纤维素分解菌筛选出来呢？ 阅读P28（二）纤维素分解菌的筛选，回答： 1、筛选纤维素分解菌用的是什么方法？这种方法是通过什么反应对微生物进行筛选的？ 2、该方法的作用原理是什么？ 3、刚果红培养基从功能上划分属于什么培养基？ 刚果红染色法 颜色 鉴别 刚果红可以与纤维素形成红色复合物，但不能 和纤维二塘以及葡萄糖发生这种反应。当纤维 素被纤维素酶分解后，红色复合物就无法形成， 出现以纤维素分解菌为中心的透明圈 掌握： 1、筛选纤维素分解菌的方法刚果红（CR）染色法。该方法可以通过颜色反应直接对微生物进行筛选。 2、其作用原理是：刚果红可以与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物就无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。 实验流程图 土壤取样 选择培养 梯度稀释 将样品涂布在鉴别纤 维素分解菌的培养基上 筛选产生透 明圈的菌落 四、实验过程 1、土壤取样： 掌握：应该在富含纤维素的环境中进行取样。纤维素分解菌大多生活