博莱霉素诱导肺纤维化初期肺动脉壁CTGF表达及罗格列酮影响.pdfVIP

中文摘要 博莱霉素诱导肺纤维化初期肺动脉壁CTGF 的表达及罗格列酮的影响 摘 要 目的：肺动脉高压是肺纤维化的常见并发症。本室以往 的研究己发现，在气管内滴注BLMl4天，模型大鼠出现肺动 脉高压，但其形成机制，目前尚不清楚。肺动脉壁胶原沉积 是肺动脉高压维持发展的一个关键环节。结缔组织生长因子 tissue (connective growth 酶体增殖活化受体7(perorxisome 具有缓解BLM诱导的肺动脉高压的作用，但其作用机制， 尚不清楚。本研究通过整体和离体实验观察气管内滴注BLM 后第14天，大鼠肺动脉壁平滑肌层I、III型胶原纤维含量的 变化、肺动脉壁内皮层和平滑肌层CTGF的表达以及RSG 对上述变化的影响，以阐明肺纤维化初期肺动脉高压形成及 RSG抗肺动脉高压的作用机制，并为寻找其治疗靶点及药物 提供实验资料。 第一部分 博莱霉素诱导肺纤维化初期肺动脉壁 CTGF的表达 14 方法：采用天狼星红染色法，观察气管内滴注BLM 天，大鼠肺动脉主干及肺内动脉壁I、III型胶原含量的变化； 并用免疫组织化学染色，观察大鼠肺动脉主干及肺内动脉壁 CTGF表达及其分布的变化。 中文摘要 内滴入生理盐水(normal (n_6)：一次性气管内滴入BLM(5mg／0．5ml／kg)。 两组大鼠分别于造模后第14天取材。经颈动脉放血处 死动物，用4％多聚甲醛溶液固定肺动脉主干及部分左肺组 织。固定后的组织经脱水、透明、石蜡包埋后切片，用于天 狼星红染色和免疫组织化学染色。JEDA．801D形态学图像分 析系统分别计算肺动脉壁I、III型胶原天狼星红染色的阳性 面积百分比、CTGF免疫组织化学染色阳性的平均光密度值 及阳性面积百分比。所有数据均用均数4-标准差陋s)表示， 采用SPSSl3．0统计软件，两样本均数比较采用t检验，以 P0．05为有显著性差异。 结果：1滴注BLM大鼠肺动脉主干I、III型胶原含量 的变化 滴注BLM大鼠肺动脉主干血管壁I型和III型胶 原纤维染色面积(分别为4．604-0．65，O．5 14-1．02) 相比增大(氏O．05)；I型和III型胶原纤维的增多突出表现为 平滑肌层，尤其I型胶原纤维增多更为明显。 2滴注BLM大鼠肺内动脉壁I、III型胶原含量的变化 滴注BLM大鼠肺内动脉壁I、III型胶原染色面积(分别为4．57 1)相比，其差异却无统计 值(2．6+0．68)与Control组(2．04+0．5 学意义(尸O．05)。 中文摘要 3滴注BLM后大鼠肺动脉主干CTGF含量的变化滴 注BLM大鼠肺动脉主干CTGF免疫阳性表达(平均光密度 0．37+0．02，阳性面积8．39+1．1 3)与Control组(平均光密度 BLM组增多主要在平滑肌层。 4滴注BLM后大鼠肺内动脉壁CTGF含量的变化 滴注BLM大鼠肺内动脉壁内皮和平滑肌细胞CTGF的免疫 相比也明显增多(尸O．05)。 小结：气管内滴入BLMl4天，大鼠肺动脉壁平滑肌层 I、III型胶原纤维的含量明显增多；肺动脉壁平滑肌层和内 皮层CTGF的表达也明显增加。这可能是BLM致肺纤维化 初期肺动脉高压维持和发展的重要机制之一。 第二部分 罗格列酮对博莱霉素诱导肺纤维化初期肺 动脉壁CTGF表达的影响 方法：采用与第一部分相同的方法，观察RSG对肺动 脉壁I、III型胶原和CTGF表达变化的影响。 内滴入生理盐水(normal 8)：一次性气管内滴入 灌胃14天