蟾蜍灵影响食管癌细胞迁移趋化运动机制的研究.pdfVIP

中文摘要 蟾蜍灵影响食管癌细胞的迁移趋化运动的机制研究 摘 要 目的：食管癌系指由食管鳞状上皮或腺上皮的异常增生所形成的恶性 病变，约占所有恶性肿瘤的2％。我国是食管癌的高发国家，目前治疗食管 癌的方法主要是手术治疗辅助放化疗。虽然对食管癌采取多种治疗方法， 但其死亡率依然没有明显下降。大多数患者就诊时已出现转移症状，食管 癌的转移对其生存率的影响至关重要。 肿瘤的发生是一个多基因参与的长期连续的过程，其中涉及了许多信 号传导通路。细胞外信号调节激酶(ERK)在30％的人类肿瘤中均存在异 将细胞外刺激转导至细胞内，从而调节细胞的增殖分化和侵袭。该通路中 通路中的重要一员，可被Ras或一些蛋白因子激活，活化的Raf-I可以进 一步激活其下游的MEK、ERK。有研究发现食管癌的发生、发展和ERK 通路有着密切的关系。 蟾蜍灵是从蟾蜍耳后提取的毒素，具防癌、抗癌，促进白细胞生长，提 高机体免疫功能等作用。有研究表明蟾蜍灵具有抗食管癌作用，但是关于 蟾毒灵抑制食管癌转移的作用和机制研究并不是很清楚。本实验通过培养 食管细胞癌株TEl3，用不同浓度的蟾蜍灵处理该细胞株，观察蟾蜍灵对 食管癌细胞株TEl3的迁移和趋化作用的影响。从蛋白水平观察蟾蜍灵作 一步探讨蟾毒灵抑制食管癌转移的机制。 方法：本实验在食管癌细胞株TEl3培养的基础上进行研究，通过 MTT方法检测细胞药物毒性，通过细胞划痕试验检测不同浓度的蟾蜍灵 对该细胞株的增殖和迁移能力的抑制作用。通过Boyden小室实验检测不 同浓度的蟾蜍灵处理后的食管癌细胞株TEl3的趋化运动情况。采用免疫 组化方法和Westernblot方法检测经不同浓度的蟾蜍灵处理后细胞株中 Raf-1、磷酸化Ra￡1蛋白的表达情况。 结果： 中文摘要 1MTT检测结果 200nM／L，400nM／L，800 nM／L及其以 nM／L。 下的药物浓度作用下，细胞存活率大于50％，即TDo为100 2不同浓度的蟾蜍素对食管癌细胞株TEl3的迁移和趋化运动的影响 细胞划痕实验显示，不同溶度的蟾蜍素处理TEl3细胞后划痕24h后，蟾 100nM／L)的蟾蜍素处理组间两两比较具有统计学意义(PO．05)。 达的影响 3．1 l、 胞浆，呈棕黄色颗粒。不同浓度的蟾蜍素处理细胞后，Raf-1实验组和对 照组的阳性细胞数量及棕黄色颗粒数均未见明显减少，没有统计学意义。 结果表明蟾蜍素对Raf-1蛋白的表达影响，无显著性差异，无统计学意义 两两比较差异均具有统计学意义(P0．05)。 结论： 1 蟾蜍素对食管鳞状细胞癌TEl3细胞株的迁移能力具有明显的抑制作 中文摘要 ’ 用。 2 蟾蜍素对食管鳞状细胞癌TEl3细胞株的趋化运动能力具有明显的抑 制作用，并且在一定药物浓度内存在剂量依赖关系。 3 ERK通路从而抑制了食管鳞状细胞癌TEl3细胞株的转移。 蜍灵；细胞迁移 英文摘要 on ofbufalinin influence themetastatic Experimentalstudy of carcinomacellline squamous esophageal callceroneI(in