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第五章 外界因素对微生物的影响 微生物多为单细胞生物,具有表面积大、新陈代谢率高、繁殖快、适应能力强以及易变异等特点,故其生命活动极易受外界环境条件的影响。了解外界环境因素对微生物的影响,以便控制外界因素,达到充分利用微生物有利的一面,消灭其有害的一面,这无论在理论上还是在实践上都具有重要意义。 本章着重介绍物理、化学、生物学因素对微生物的抑制或杀灭作用以及消毒灭菌方法,在具体讨论这些内容之前,先简要介绍几个基本概念: 第一节 物理因素 温度 干燥 渗透压 辐射 过滤 其他物理因素 一 、温度 高温对微生物有明显的致死作用,其主要是高温能使菌体蛋白质变性或凝固,酶失去活性,核酸结构遭到破坏等,从而导致其死亡。因此热力灭菌是应用最早、效果最好、应用范围最广的灭菌方法。 1 干热灭菌(dry heat sterilization ) 焚烧灭菌法:常用于废弃物、病畜尸体等处理。 烧灼灭菌法:是直接火焰灭菌,如接种环、试管口等的灭菌。 烘烤灭菌法:利用干燥烘箱以热空气进行灭菌的一种方法。适用于高温下不变质、不损坏等物品的灭菌,如玻璃器皿、金属制品等。由于热空气穿透力较低,因此需加热到160℃维持1-2小时才能达到灭菌目的。 2 湿热灭菌(mosist heat sterilization) 在同温度下,湿热灭菌的效果比干热灭菌好;因为: ①蛋白质在含水多的环境中遇热容易凝固,湿热灭菌时,菌体蛋白质吸收水分,从而加速了蛋白质的凝固变性。 ②湿热传导快,穿透性强,可使灭菌对象内部温度迅速提高。 ③湿热灭菌时,蒸气接触到物体表面即凝集成水,同时放出潜热,这种潜热能迅速提高灭菌物体的温度。 湿热灭菌法 煮沸消毒法 流通蒸汽消毒法 间歇灭菌法 高压蒸汽灭菌法 巴氏消毒法 A、煮沸消毒法 物品在水中煮沸15min,可杀死所有绝大多数病原微生物和一切细菌繁殖体。但芽胞抗煮沸能力较强, 有的需煮沸几个小时才能将其杀灭,适用于玻璃器皿、外科器械等的消毒。 在水中加入1-2%的碳酸钠可提高沸点,既可加强杀芽胞的效果,又能防止金属器械生锈。 B、流通蒸汽消毒法(常压蒸汽消毒) 用普通蒸笼或流通蒸汽灭菌器,在1个大气压下,用100度左右的水蒸气,经30min,即可杀死大多数病原微生物及细菌的繁殖体,但不能杀死芽胞。常用于食品、食具和一些不耐热物品的消毒。 C、间歇灭菌法(fractional sterilization) 是用常压蒸汽反复几次进行灭菌的方法。 主要用于不宜高压灭菌的培养基,不耐热的药物和营养物等。 方法是将待灭菌物品置于蒸锅或流通蒸汽灭菌器内加热到沸腾维持15-30min杀死营养细胞,取出冷却后在37℃恒温培养24小时,使芽胞萌发,再用此法灭菌,反复三次,即可达到灭菌目的。 D、高压蒸汽灭菌法 是湿热灭菌中最好的方法,通常1.05kg/cm2,的压力下面(此时温度121oC)处理15-30min。要排冷空气,否则 会形成假压力,虽然压力达到要求,温度却达不到相应温度,而影响灭菌效果。 高压蒸汽灭菌器的用法及其注意事项: 1 在灭菌器内加入适量的水,约至金属隔板处。 2 将灭菌物品包扎好,小心放于隔板上。 3 将盖盖好,扭紧螺旋,关闭气门。 4 接通电源,进行加热。 5 压强指针升至(1.38-2.07) ×104Pa时,打开气门,排出器内所留空气,直至排出完毕,关紧气门。 6 压强上至所需压强时,开始计时,达到规定时间后关掉电源。 7 待灭菌器中压力自行降至零时,方可慢慢打开气门,放气、排气完毕后,开盖取出被灭菌物品,气未排完前切不可开盖。 8 对灭菌器进行必要的清洗。 E、巴氏消毒法(pasteurization) a) 是以较低的温度杀灭液体食品及物品中的病原菌或特定微生物,又不破坏其营养成分及有效成分的消毒方法。这样即可杀死病原微生物,又不致损坏营养,可保留食品饮料原有风味。常用于食品(牛奶)、酿造(葡萄酒、啤酒)工业及蜂蜜的消毒。 b) 做法是61.7-62.8℃处理30min或71.6℃处理15s,速冷却至10℃下,即可杀死其中的结核杆菌或布氏杆菌等。 c) 为节省时间,又达到巴氏消毒的效果,现多用超高温瞬时消毒132℃下1-2s。 3 影响热力灭菌的因素 (1)微生物:不同种类微生物以及同种微生物的不同发育阶段对热的抵抗力不同(多数细菌,酵母菌和霉菌的营养细胞和病毒在50-65 oC10 min可以致死,细菌芽胞,在121 oC下5-20min才能致死);微生物的密集程度.
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