化学毒物的致突变作用.ppt

化学毒物的致突变作用 教学内容 基本概念和突变类型 致突变的机理 突变的后果 致突变性评价方法 教学目的 了解遗传学基础，致突变实验中存在问题； 熟悉DNA损伤的修复，机体对致突变作用影响； 掌握致突变类型、机制和后果，常用致突变实验的原理 教学重点及难点 致突变作用的概念 致突变作用的类型 致突变作用的机制 致突变作用的后果 Ames试验 §1 概述（基本概念） 1、DNA 2、基因 3、染色质和染色体 4、细胞周期与细胞分裂 细胞从DNA复制起，经过分裂直到把DNA均等地分配到两个新的子细胞的全过程。 5、体细胞与生殖细胞 6、遗传与变异 自发变异 DNA的复制错误 自发的化学变化 诱发变异 射线 化学诱变剂 7、致突变作用 外源化学物及其它环境因素能引起细胞核中的遗传物质发生变化，这种改变随同细胞分裂过程而传递的过程称为致突变作用 §2 致突变作用的类型 碱基置换 移码 大段损伤 大片段损伤是指DNA链大段缺失或插入。这种损伤有时可跨越两个或数个基因，但所缺失的片段仍远小于光镜下所能观察到的染色体变化，故又可称为小缺失。 染色体数目异常 §3 致突变的机理 一、DNA的损伤 以DNA为靶的直接诱变 不以DNA为靶的间接诱变 二、DNA损伤的修复 光复活 切除修复 重组修复 SOS修复 （一）以DNA为靶的直接诱变 （1）烷化剂的影响 烷化剂所致的碱基损伤可表现为错配。 烷化剂提供烷基与DNA共价化合； 烷化碱基引起DNA二级结构改变。 （一）以DNA为靶的直接诱变 （2）平面大分子嵌入DNA链 有些大分子能以静电吸附形式嵌入DNA单链的碱基之间或DNA双螺旋结构的相邻多核苷酸链之间，称为嵌入剂(intercalating agent)。 它们多数是多环的平面结构， 易于嵌入DNA单链的碱基之间或DNA双螺旋结构的相邻多核苷酸链之间，造成移码突变。 （一）以DNA为靶的直接诱变 （3）碱基类似物的（base analogue）取代 取代后的碱基类似物出现异构互变,发生错误配对而造成碱基置换。 例如：5-溴脱氧尿嘧啶（5-BU）取代T，2- 氨基嘌呤（2-AP）取代G。 （一）以DNA为靶的直接诱变 （4）改变或破坏碱基化学结构 有些化学物可对碱基产生氧化作用，从而破坏碱基的结构，有时还可引起链断裂。还有些物质可在体内形成有机氧化物或自由基，可间接使嘌呤的化学结构破坏，容易出现DNA链断裂。 （一）以DNA为靶的直接诱变 （5）二聚体的形成 （一）以DNA为靶的直接诱变 （6）DNA加合物和交联分子的形成 亲电子剂极易与蛋白质或核酸等大分子物质中亲核基团（如—SH、—OH、—N=等）发生共价结合，形成加合物或交联分子。如苯并芘代谢产物与DNA形成的加合物分子巨大，使DNA构象改变，诱发突变。 亚硝酸、丝裂霉素C等使形成DNA—DNA交联使复制时不能解链，DNA复制和转录完全停止，细胞死亡。 烷化剂、苯并芘、砷化物、醛类化合物、一些重金属等与DNA的核蛋白交联形成DNA—蛋白质交联物对DNA构象与功能造成严重影响。 DNA加合物的形成可活化癌基因，影响调节基因和抑癌基因的表达。 （二）不以DNA为靶的间接诱变 主要涉及细胞分裂过程的改变如纺锤体、微管蛋白的合成与聚合，微管结合蛋白的合成与功能发挥，细胞分裂纺锤纤维的功能发挥等。 1、纺锤体抑制 （1）与微管蛋白二聚体结合 （2）与微管上的巯基结合 （3）破坏已组装的微管 （4）妨碍中心粒移动 （5）其它 2、对DNA合成和修复有关的酶系统作用 对DNA合成和复制有关的酶系统作用也可间接影响遗传物质。 例如，一些氨基酸类似物可使与DNA合成有关的酶系统遭受破坏而诱发突变；铍和锰除可直接作用于DNA外，还可与酶促防错修复系统相作用而诱发突变。 修复过程中的酶 复制 切除修复 §4 突变的后果 体细胞突变 仅影响接触致突变物的个体，不影响下一代。 肿瘤、畸形、动脉粥样硬化、糖尿病及衰老等。 生殖细胞突变 可影响下一代，甚至人类的基因。 基因突变对人类的影响程度分为五类。 对机体无影响，如同义突变； 导致对健康无影响的正常人体生化组成的遗传学变异； 导致遗传易感性的改变； 导致遗传性疾病； 致死性突变，造成配子死亡、死胎及自发流产等。 §5 化学毒物致突变作用的研究方法 基因突变和染色体畸变的检测可直接反映化学毒物的致突变性，是评价化学毒物致突变性唯一可靠的方法。还有许多试验所观察到的现象并不反映基因突变、染色体畸变和染色体分离异常，而仅反映致突变过程中发生的其他事件。因此将试验观察到的现象所反映的各种事件称为遗传学终点。 遗传学终点分为：基因突变、染