发酵工艺条件确定.ppt

第六章 发酵工艺的控制 第一节 发酵过程的主要控制参数 第二节 培养条件的确定 第三节 菌体浓度的影响及其控制 第四节 基质的影响及其控制 第五节 温度的影响及其控制 第六节 pH的影响及控制 第七节 溶氧的影响和控制 第八节 二氧化碳的影响及其控制 第九节 补料的作用和控制 第十节 泡沫的作用和控制 第十一节 染菌的防治 发酵工艺过程，不同于化学反应过程，它既涉及生物细胞的生长、生理和繁殖等生命过程，又涉及生物细胞分泌的各种酶所催化的生化反应过程。 发酵工程是生物应用工程学科，是微生物学在工业生产领域的大规模应用，是化学工程在生物技术领域的延伸，是生物、化学和工程等学科的综合利用。 第一节 发酵过程的主要控制参数 1. 物理参数 （1）温度（℃） 直接影响发酵过程的酶反应速率，氧的溶解度和传递速率，菌体生长速率和合成速率。 （2）压力（Pa） 影响发酵过程氧和CO2的溶解度，正压防止外界杂菌污染。罐压一般控制在0.2×105～0.5×105 Pa。 （3）搅拌速度（r/min） 搅拌器在发酵过程中的转动速度。 其大小影响发酵过程氧的传递速率，受醪液的流变学性质影响，还受发酵罐的容积限制（见下表） （4）搅拌功率（kW） 搅拌器搅拌时所消耗的功率（kW/m3），在发酵过程中的转动速度。 其大小与液相体积氧传递系数有关。 （5）空气流量（m3空气/（m3发酵液·min）） 单位时间内单位体积发酵液里通入空气的体积，一般控制在0.5～1.0（m3空气/（m3发酵液·min）） （6）粘度（Pa·s） 细胞生长或细胞形态的一种标志，反映发酵罐中的菌丝分裂情况，表示菌体的浓度。 （7）浊度（％） 反映应单细胞生长情况 （8）料液流量（L/min） 进料参数 2. 化学参数 （1）pH （酸碱度） 发酵工艺重要的参数之一，与菌体生长和产物合成有密切关系。包括起始pH ，发酵过程中的pH ，后者反应菌体的生理特性。 （2）基质浓度（g/L） 发酵液中糖、氮、磷等重要营养物质的浓度，对菌体的生长和代谢合成有重要影响，是产物代谢控制的重要手段。发酵过程中必须定时测定糖或氮（氨基酸或铵氮）等的浓度。 （3）溶解氧浓度（ppm或饱和度，％） 溶解氧是好氧发酵的必备条件，是生化产能反应的最终电子受体，也是细胞及产物重要的组分。通常用饱和百分度表示。 （4）氧化还原电位（mV） 培养基的氧化还原电位是影响微生物生长及生化活性的因素之一。在某些限氧发酵（如氨基酸），氧电极以不能精确使用，氧化还原电位参数控制较为理想。 （5）产物浓度（μg（u）/ml） 检验发酵是否正常与否的重要参数， 是决定发酵周期长短的根据. （6）废气中的氧浓度（Pa） 废气中的氧浓度与发酵微生物的摄氧率和KLa有关，以此确定发的供氧能力。 （7）废气中的CO2浓度（%） 根据废气中的氧浓度和CO2浓度，以此计算产生菌的呼吸商，了解产生菌的呼吸代谢规律。 3. 生物参数 （1）菌丝形态 菌丝形态是衡量种子质量、区分发酵阶段、控制发酵过程的代谢变化和决定发酵周期的依据之一。 （2）菌体浓度 菌体浓度是控制微生物发酵的重要参数之一。生产上，常常根据菌体浓度来决定补料量和供氧量，以保证生产达到预期水平。 根据菌体浓度研究菌体比生长率，基质比消耗率等动力学参数，以此确定最佳发酵工艺。 第二节发酵过程中的代谢变化 代谢变化反映了菌体生长、发酵参数和产物生成速度的关系。 Gaden把微生物发酵过程分为三种类型： Ⅰ型，生长产物合成偶联型： 微生物的生长和糖的利用与产物合成直接相关连，产物的形成与生长是平行的，产物合成速度与微生物生长速度呈线性关系，而且生长与营养物的消耗成准定量关系。产物直接来源于产能的初级代谢。 如酒精、葡萄糖酸、乳酸发酵就属于此类型 Ⅱ型，生长产物合成半偶联类型： 产物的合成来自次级代谢，存在着与生长相联和不相联两个部分，先是基质消耗和菌体生长高峰，后是菌体进入生长静止期，出现产物形成高峰。 如柠檬酸、谷氨酸、赖氨酸、依康酸、丙酮、丁醇发酵 Ⅲ型，生产与产物合成非偶联类型： 菌体生长和产物合成完全分开的，如各种抗生素和微生物毒素等物质的生产速率很难与生长相联系。产物合成速度与碳源利用也不存在定量关系。 产物的合成是在菌体的浓度达到最高之后才开始的， 如青霉素、链霉素、核黄素、糖化酶的发酵。 Ⅰ型，生长产物合成偶联型： Ⅱ型，生长产物合成半偶联类型： Ⅲ型，生产与产物合成非偶联类型： 1. 初级代谢的代谢变化 初级代谢是生物细胞在生命活动中进行的代谢活动，初级代谢产物是菌体生长繁殖所必需的。 初级代谢菌体生长过程呈现延滞期、对数期、静止期和死亡期。除对数期的微生物外，其他时期的微生物作为发酵种子均会出现延滞期。 延滞期的长短还会受菌体