基因工程(一).ppt

①在DNA分子内部起作用 一种限制酶只能识别特定的核苷酸序列，并在特定切点上切割DNA分子 特点： 主要存在于原核生物中 分布： 作用部位： 磷酸二酯键 例：大肠杆菌中的限制酶EcoRI，只能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开DNA。 例：另一种限制酶SmaI，只能识别CCCGGG序列，并在G和C之间切开DNA。 C C C G G G G G G C C C C C C G G G G G G C C C 比较这两种酶的切割末端，看有什么不同，这种末端有什么特点？ C C C G G G G G G C C C C C C G G G G G G C C C “黏性末端” “平末端” 注意：不同的限制酶所识别的核苷酸序列不同，切割DNA分子的切点也不同，产生的黏性末端也不同 “黏性末端” 被限制酶切开的DNA单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，它们之间正好碱基互补配对，这样的切口叫黏性末端。 思考 　 用同一种限制酶切割不同的DNA分子，会出现什么样的结果？ 产生相同的黏性末端 重组DNA分子 　 DNA连接酶的作用是将黏性末端的氢键缝合吗？它的作用部位是哪儿？ 连接酶的作用部位： 在DNA分子内部的磷酸二脂键 DNA连接酶——“分子缝合针” DNA连接酶——“分子缝合针” 阅读课本P5，了解基因工程中常用的DNA连接酶的种类及作用，比较它们的不同 连接黏性末端 连接黏性末端和平末端 分类 作用 E.coli DNA连接酶 T4DNA连接酶 基因进入受体细胞的载体 ——“分子运输车” 想一想作为基因载体必需具备的条件： 1、载体DNA能在受体细胞内自我复制或整合到受体细胞的DNA上随受体DNA同步复制。 2、载体DNA上有一个至多个限制酶切割位点以便和目的基因插入 3、载体DNA上一般要有特殊的标记基因，以便供重组DNA的鉴定和选择 标记基因： 载体DNA所特有的，受体细胞没有的基因（可作为载体DNA的标志） 4、载体DNA大小不能太大，以方便提取和体外操作 基因工程中最常用的载体——质粒 质粒 拟核DNA （标记基因） 细菌和酵母菌等生物中核DNA以外能自主复制的小型环状DNA分子 质粒 重组质粒 基因工程中常用的其它载体 阅读课本P6，了解基因工程中常用的其它载体，想一想它们分别适用于向哪些受体细胞中运输基因？ 受体细胞为细菌 受体细胞为动物、植物细胞 种类 适用对象 噬菌体衍生物 动、植物病毒 三、知识联想 能力提升： 想一想培育抗虫棉的一般思路： 苏云金芽胞杆菌 提取 毒蛋白基因 普通棉花(无抗虫特性) 棉花细胞(含抗虫基因) 与运载体DNA拼接，导入 棉花植株(有抗虫特性) 表达 练习 在基因工程中，切割运载体和含有目的基因的DNA片段，需使用（ ） 同种限制酶 B. 两种限制酶 同种连接酶 D. 两种连接酶 不属于质粒被选为基因运载体的理由是 A、能复制 （ ） B、有多个限制酶切点 C、具有标记基因 D、它是环状DNA D 练习 人的血清 蛋白基因 基因表达载体 载体 性成熟的雄牛 性成熟的雌牛 精子 卵母细胞 受精卵 早期胚胎 妊娠 转基因牛 ① ② ③ ④ ⑥ ⑤ 一、情景引入 整体感知： 1. 认真观察下面的图片，思考然后回答下列问题 能否培养出具有抗虫 性状的抗虫棉呢？ 设想一 抗虫生物 提取 抗虫基因 普通棉花(无抗虫特性) 棉花细胞(含抗虫基因) 导入 棉花植株(有抗虫特性) 表达 基因工程的概念 基因工程： 指按照人们的愿望,进行严格的设计并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。 二、深入探究 掌握规律： 阅读专题1首页，了解基因工程的概念，找出基因工程概念中的要点 操作对象：DNA 1 操作水平：分子水平 2 操作场所：细胞外（体外） 3 要点： 4 主要特点： 定向改造生物的遗传性状 5 目的： 获得人类所需要的基因产物 导入的目的基因能在受体细胞中正常表达 目的基因： 用于改变生物性状和获得预期表达产物的基因 供体细胞：提供目的基因的细胞 受体细胞：接受目的基因的细胞 基因的结构 原核基因的结构 启动子 编码区 非编码区 非编码区 可以转录出mRNA 可以控制蛋白质的合成 不能编码蛋白质，对遗传信息的表达起调控作用 RNA聚