EVn-50对人视网膜母细胞瘤细胞生长和凋亡作用的影响.pdfVIP

目 录 中英文缩略词表1 中文摘要2 英文摘要4 前言7 材料与方法9 结果15 讨论26 结论30 参考文献31 综述35 攻读硕士学位期间完成、发表论文情况43 致谢44 中英文缩略词表 缩略词 英文全称 中文全称 A Absorbance 吸光度 AO/EB Acridine orange/ ethidium bromide 丫啶橙/溴化乙啶 bp Base pair 碱基对 DMSO Dimethyl sulfoxide 二甲基亚砜 TAX Taxinol 紫杉醇 EVn-50 Extract of the Vitex Negundo Seeds 黄荆子乙酸乙酯提取物 FCM Flow cytometry 流式细胞术 FCS Fetal calf serum 小牛血清 HCPT Hydroxycamptothecin 羟基喜树碱 HE Hematoxylin-eosine staining method 苏木素-伊红染色法 IC50 50% inhibitory concentration 50%抑制浓度 IR Inhibition ratio 抑制率 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5- MTT diphenyltetrazolium bromide 溴化四甲基偶氮唑蓝 PBS Phosphate buffered saline 磷酸盐缓冲液 PI Propidium iodide 碘化丙啶 S.D Standand Deviation 标准差 1 中 文 摘 要 目的 研究黄荆子乙酸乙酯提取物(EVn-50)抑制体外培养人视网膜母细胞瘤细胞 （RB 细胞）生长作用以及诱导RB 细胞凋亡作用，为开发和研制临床治疗人视 网膜母细胞瘤候选药物提供实验和理论依据。 方法 体外培养RB 细胞；MTT 比色法测定EVn-50 对RB 细胞增殖活性的影响； 细胞计数法检测RB 细胞存活率，绘制生长曲线；软琼脂集落形成法测定EVn-50 抑制体外培养RB 细胞的锚定非依赖性生长作用；PI 染色流式细胞术（FCM ）定 量分析EVn-50 诱导RB 细胞凋亡程度；AO/EB 染色荧光显微镜观察EVn-50 诱 导RB 细胞凋亡的形态学改变；DNA 琼脂糖凝胶电泳确证EVn-50 诱导RB 细胞 凋亡作用。 结果 MTT 比色法测定结果显示：EVn-50 可作为黄荆子抗 RB 的有效提取物。 EVn-50 对RB 细胞增殖活性抑制作用强，并呈浓度依赖性，其IC50 为9.60µg/ml； 细胞计数结果表明：0.3、3.0、30.0µg/ml 的EVn-50 均具有抑制RB 细胞生长作 用，呈浓度和时间依赖性；软琼脂集落形成法的结果表明：EVn-50 对RB 细胞 锚定非依赖性生长具有明显的抑制作用，并呈浓度依赖性。PI