作为视网膜母细胞瘤的潜在治疗方法,在兔子玻璃体注射拓扑替康对其眼部和全身毒性的研究.docxVIP

作为视网膜母细胞瘤的潜在治疗方法，在兔子玻璃体注射拓扑替康对其眼部及全身毒性的研究 摘要:伴随玻璃状种子的眼内成视网膜细胞瘤的治疗很具有挑战性。为了达到药理浓度进入后室的目的，已经探索过许多不同的化学治疗途径。玻璃体内的药物注射有望最大限度地发挥药物对于玻璃体的生物药效率，但是注射需要确定一个非常明确的剂量，在达到对肿瘤有效控制的同时尽量限制住对于视网膜的毒性。实验证明，拓扑替康是治疗成视网膜细胞瘤的一种很有前途的药剂，由于它的药理作用和有限的毒性。在小兔子的玻璃体内注射了5微克的拓扑替康之后，实现了较高和较持久的药理浓度。然而，较低剂量的注射是否能够达到潜在的治疗水平仍然待定。因此，我们现在研究在兔眼玻璃体中注射0.5微克拓扑替康之后，其药代动力学和毒性概况，以作为一种成视网膜细胞瘤的潜在治疗方法。我们选用了一组兔子来研究其玻璃体内注射了0.5微克的拓扑替康之后，药物在其玻璃体内的变化过程。另外，我们采用了一组独立的不含肿瘤的兔子来对比评价其他两组右眼注射了不同剂量（A组剂量5微克，B组剂量0.5微克）的玻璃体内拓扑替康四周之后，兔子的临床和视网膜毒性情况。兔子的左眼同时注射同样剂量（0.1毫升）的生理盐水。第三组兔子（C组）则采用双重控制（双眼均注射生理盐水）。每周测试动物的临床表现和血液系统，同时采用眼底镜测试动物视力来反面验证拓扑替康的潜在毒性。每周的测试包括所有兔子体内拓扑替康等离子体的数量。在注射拓扑替康前后，分别测试视网膜电流图（ERGs）。在最后一次注射一周之后，测试所有眼睛玻璃体内拓扑替康的浓度并且取得视网膜组织学的样本。实验结果表明，在0.5微克-5微克范围内注射单一剂量之后，拓扑替康表现出非线性的药代动力学。在玻璃体内注射了0.5微克拓扑替康5小时之后，兔子玻璃体内酯拓扑替康的浓度接近于假设的有疗效的药物浓度。注射了四周剂量的拓扑替康（0.5或5微克）的兔眼睛与控制组（P0.05）相比，在其视网膜电流图上没有表现出明显的振幅和隐式次数的变化。动物在测试期间，没有表现出体重变化，脱毛或血液???准的重要变化。对于拓扑替康的治疗，视网膜没有表现出重大的组织学损伤。在最后一次注射一周之后，药物经过玻璃体内的实施，在血浆中没有检测到拓扑替康浓度，无论在接下来的时期内或是在治疗或控制的兔眼的玻璃体内。目前的数据表明，连续四周（每周一次）在玻璃体内注射5微克拓扑替康对兔眼来说是安全的。尽管多倍注射0.5微克的拓扑替康对兔眼来说同样安全，但是内酯拓扑替康的浓度只能在实施5小时之后才有可能产生作用。我们假设这有可能转化为成视网膜细胞瘤治疗的临床方法。 前言 肿瘤细胞内的玻璃体晶种构成了治疗眼内成视网膜细胞瘤的最大障碍，所以人们探索新的局部治疗的方式以提高药物对于玻璃体的作用效应(Rodriguez-Galindo et al., 2007).为了治疗成视网膜细胞瘤，化疗药物在玻璃体内的实施近年来引起了极大关注（Munier etal.,2012a,b; Seregard and Singh, 2012）。尽管药物的实施可看作一项相当简单的技术，但是由于改变了眼睛结构的完整性，因而存在着轨道传播的风险。轨道的肿瘤晶体会穿过针状的轨道可能是这项技术最严重的并发症，然而大部分经过这种途径治疗的病人并没有表现出轨道复发，而且最新的能最大地降低这种风险的技术已经发布(Munier et al.,2012a,b)。另外，在玻璃体内直接注射以后，玻璃体的药物水平能够达到极高的标准而且能够维持长期的药物作用，所以对于视网膜毒性的风险应该仔细考量，这也将限制这项技术的发展。(Buitrago et al., 2010)。由于这些限制，长久以来玻璃体内的化学治疗并没有并没有成为一种广泛应用的治疗成视网膜细胞瘤技术。 许多药物已经被用于玻璃体内注射，包括美法仑，噻替派，甲氨蝶呤和最近的拓扑替康(Kaneko and Suzuki,2003;Kivel? et al.,2011;Seregard and Singh, 2012;Darsova et al., 2011）。拓扑替康是一种内酯形式的拓扑异构酶的抑制剂，并且经证实在动物或病人的成视网膜细胞瘤的细胞系内具有活性(Chantada et al.,2004; Laurie et al., 2005)。对于成视网膜细胞瘤的治疗已经探索过许多实施途径，包括静脉内的，眼周的，动脉内的包括药物循环系统，但是玻璃体内的实施相关参考数据十分有限(Buitrago et al.,2010; Carcaboso et al., 2007;Chantada et al., 2010;Nemeth et al., 2011;Schaiquevich et al., 2012）。 我们之前的研究结果表明，与