Bcl-XL siRNA在TRAIL杀伤卵巢癌细胞中的增敏作用.pdfVIP

中国肿瘤生物治疗杂志 · 522· Chinese Journal of Cancer Biotherapy Vo1．14 No．6 Dec．20o7 [文章编号] 1007-385X(2007)06-0522-05 · 论 著· Bcl-XL siRNA在TRAIL杀伤卵巢癌细胞中的增敏作用 胡静姿’，朱洪波n，黄学锋 ，何 超 (1．南京军区杭州空军疗养院妇产科，杭州 310013；2．浙江大学医学院附 属邵逸夫医院肛肠外科，杭州 310016) [摘 要] 目的：探讨Bcl一舰 siRNA在肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体(TRAIL)杀伤卵巢癌细胞中的增敏作用。方法：用 Bcl-XL siRNA转染卵巢癌SKOV3细胞，然后联合应用TRAIL蛋白处理该细胞；通过流式细胞术检测细胞的凋亡率，通过锥虫 蓝染色细胞计数检测细胞存活情况，通过Western blotting检测细胞中各种凋亡相关蛋白的活化情况。结杲：与对照组相比， 经Bcl一舰 siRNA处理后，SKOV3细胞中Bcl—XL蛋白的表达显著降低；该细胞的增殖受到明显抑制，在处理96 h后最为明显， 仅为对照组的43．9％(P0．05)。当Bcl—XL siRNA和TRAIL蛋白联合处理后，SKOV3细胞的凋亡率明显增加，达到32％以上 (P0．05)，而细胞计数结果显示联合处理后SKOV3细胞的存活率显著下降，仅为对照组的37．8％(P0．05)。Western blot． ring结果显示，Bcl—XL siRNA和TRAIL蛋白联合处理后凋亡相关蛋白Caspase-8、Caspase-9、Bid、Caspase-3和PARP明显活化， 细胞色素C的释放也显著增加。结论：Bcl-XL siRNA能显著加强TRAIL蛋白对卵巢癌细胞的杀伤作用，其作用机制可能与激 活多种凋亡信号蛋白有关。Bcl—XL siRNA可能成为逆转卵巢癌TRAIL耐药的治疗措施。 [关键词】 Bcl—XL siRNA；肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体(TRAIL)；卵巢癌细胞；耐药性；凋亡 [中图分类号】 R737．31 [文献标志码] A Bcl-XL siRNA sensitizes ovary cancer cells in TRAIL-induced apoptosis HU Jing．zi ，ZHU Hong．bo ，HUANG Xue．feng ，HE Chao (1。Depa~ment of Gynecology，Hangzhou Sanitarium of Air． force，PLA Nanjing Military Area Command，Hangzhou 310013，China；2．Department of Colorectal Surgery，Sir Run Run Shaw Hospital，Zhejiang University，Hangzhou 3 10016，China) [Abstract】 Objective：To investigate the role of Bcl-XL siRNA in sensitizing ovary cancer cells for TRAIL—induced apoptosis and the underlying mechanisms．Methods：Western blotting analysis was performed to confirm whether Bcl—XL siRNA could effectively down-regulate Bcl-XL protein after SKOV3 cells were transfected with Bcl-XL siRNA and then the cells were treated with TRAIL．Flow cytometry analysis and cell counting were used for assessment of apoptotic rate and survival rate，respectively．Western blotting analysis was performed to determine the changes