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微生物工程选读.docx

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微生物工程试卷题型分配:名词解释: 15题 共45分简答题: 7题 共35分论述题: 2题 共20分第一章 概论微生物工程:即是指发酵工程,指采用现代工程技术手段,利用微生物的某些特定功能,为人类生产有用的产品,或直接把微生物应用于工业生产过程的一种技术.简述微生物工程发展简史(四个阶段特征):天然发酵,纯培养技术,深层培养技术,微生物工程.简述微生物工程组成及研究内容:从广义上讲,由三部分组成:上游工程,发酵工程,下游工程。微生物工程研究内容:无菌生长技术,计算机控制技术,种子培养和生产培养工艺技术,小试中试动力学模型,发酵工程工艺放大。第二章 生产菌种的来源试述生产菌种的来源及其分离思路来源:根据资料直接向科研单位、高等院校、工厂或菌种保藏部门索取或购买;从大自然中分离筛选新的微生物菌种。分离思路:依照生产要求、产物性质、菌种特性(分类地位及生态环境),设计各种筛选方法,快速、准确地把所需要的菌种挑选出来试述生物物质产生菌的分离纯化和筛选步骤定方案:查阅资料,了解所需菌种的生长培养特性。标本采集:有针对性地采集样品增殖:人为地通过控制养分或培条件,使所需菌种增殖培养后,在数量上占优势。分离:利用分离技术得到纯种。性能鉴定发酵性能测定:进行生产性能测定。这些特性包括形态、培养特征、营养要求、生理生化特性、发酵周期、产品品种和产量、耐受最高温度、生长和发酵最适温度、最适 pH值、提取工艺等。第三章 微生物代谢调节及代谢工程新陈代谢(分解代谢、合成代谢):是指发生在活细胞中的各种分解代谢和合成代谢的总和。分解代谢:指复杂的有机物分子通过分解代谢酶系的催化,产生简单分子、腺苷三磷酸(ATP)形式的能量和还原力(或称还原当量,一般用[H]来表示)的作用。合成代谢:与分解代谢正好相反,是指在合成代谢酶系的催化下,由简单小分子、ATP形式的能量和[H]形式的还原力一起合成复杂大分子的过程。酶活性调节:酶分子水平上的一种代谢调节,通过改变酶分子活性来调节新陈代谢的速率,包括:酶活性的激活和抑制两个方面。酶活性激活系指在分解代谢途径中,后面的反应可被较前面的中间产物所促进。酶活性的抑制主要是反馈抑制,它主要表现在某代谢途径的末端产物(即终产物)过量时,这个产物可反过来直接抑制该途径中第一个酶的活性,促使整个反应过程减慢或停止,从而避免末端产物过多累积。能荷:细胞 ATP、ADP、AMP可作为代谢反应功能的高能磷酸键的量度,通过 ATP、ADP、AMP三者的比例调节代谢协同反馈抑制:指分支代谢途径中的几个末端产物同时过量时才能抑制共同途径中的第一个酶的一种反馈调节方式合作反馈抑制:两种末端产物同时存在时,可以起着比一种末端产物大得多的反馈抑制作用累积反馈抑制:每一分支途径的末端产物按一定百分率单独抑制共同途径中前面的酶,所以当几种末端产物共同存在时,它们的抑制作用发生累积顺序反馈抑制:通过逐步有顺序的方式达到的调节称为顺序反馈抑制试述酶活性调节、合成调节的异同点:不同点:(1)从调节对象看:酶合成的调节是通过酶量的变化控制代谢速率,而酶活性的调节是对已存在的酶活性进行控制,它不涉及酶量变化。 (2)从调节效果来看:酶活性调节快速而精细; (3)从调节机制看,酶合成调节是基因水平调节,它调节控制酶合成;酶活性调节是代谢调节,它调节酶活性。第四章 优良菌种选育原生质体融合技术:原生质休融合育种是基因重组的一种重要方法。诱变剂 :能提高生物体突变频率的物质称为诱变剂试述优良菌种应具备的条件:产生大量发酵产物,投资减少,生产能力提高;副产物及其他产物不产生或少产生,转化率提高,分离纯化难度、成本降低,品质提高;生长繁殖快,生长速率强,缩短发酵周期,设备投资运转费用减少,减少菌种退化及污染几率。高效转化产品,降低成本,竞争力提高;能利用廉价原料,对原料成分敏感性小;对添加的前提物质有耐受力;泡沫少,提高装料系数、提高单罐产量及降低成本。具有抗噬菌体感染的能力。遗传特性稳定试述基因工程技术育种步骤:(1)获得待克隆的 DNA片段(基因);(2)目的基因与载体在体外连接;(3)重组 DNA分子导入宿主细胞;(4)筛选、鉴定阳性重组子;(5)重组子的扩增与表达。酵母载体:可携带外源基因在酵母细胞内保存和复制,并随酵母分裂传递到子代细胞的 DNA或 RNA。酵母载体有哪些类型?Yep类—酵母附加体质粒;YRp 类—酵母复制质粒;YCp类—酵母中心粒质粒;YIp—酵母整合型质粒;质粒不稳定产生的原因有哪些?分裂不稳定:工程菌分裂时出现一定比例不含质粒子代菌的现象;结构不稳定:外源基因从质粒上丢失或碱基重排、缺失所致工程菌性能的改变;如何提高稳定性

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