2.3常规组织病理技术.ppt

常规组织病理技术 病理标本的接收 病理标本的接收是在取材、固定组织前首先要做的第一步工作，它是临床与病理科交接的一个重要环节，它为开展病理学检查、病理档案的保存奠定了基础。? 1．首先核对病理申请单与标本上的红色号码是否一致。? 2．核查病理申请单上写明的送检标本及数目是否与实际送检标本一致。?3．观察送检标本的大小及固定液比例是否合适。? (1)穿刺活检及纤支镜所取的小标本，4％中性甲醛(10％中性福尔马林)固定组织的量应在6～10倍。? (2)对于较大的手术切除标本，应及时切开固定；核对后将病理申请单和标本编上病理标本号。? 4．将病人姓名、性别、年龄、病历号、科别、临床诊断、部位、标本来源、标本例数等逐项录入电脑存储。? 5．作为病理资料不仅要做好计算机录入工作，还须进行文字登记，以便病理档案长期保存。 常规石蜡切片制作程序 组织固定 取材 固定 脱水 透明 浸腊 包埋 切片 染色 封片 显微镜观察 一 固 定 1.组织固定的意义 ①防止组织细胞自溶和腐败 ②保持组织细胞正常生活时的形态结构 ③沉淀和凝固各种物质,硬化组织便于制片和染色后的观察 2.固定的注意事项 ①一般应在离体30分钟内固定,越及时越好,并将组织上的血液,分泌物冲洗干净 ②固定剂的量一般不少于组织块总体积的4倍以上 ③固定的时间应视组织的不同和大小决定,一般小组织4-6小时,大组织18-24小时或更长 ④有特殊要求的须用特殊的固定剂 ⑤不同组织在固定时应注意特殊的处理方法 3.常用的固定剂 ①甲醛(10%福尔马林) 甲醛 100ml 水 900ml ②中性甲醛 甲醛 100 ml Na2HPO4 6.5g NaH2PO4 H2O 4g 蒸馏水至 900 ml ③乙醇-甲醛(AF液) 甲醛 100 ml 95%乙醇 850 ml 冰醋酸 50 ml ④其他 4%多聚甲醛 :多聚甲醛4g, 加蒸馏水50ml,加热至60度,搅拌加入1mol/L NaoH数滴,直至溶液变清,冷却后用0.1mol/L PBS( PH7.4 )加至100ml. Carnoy氏液(糖原,DNA,RNA,尼氏小体固定用,小组织20-40分钟,不超过3-4小时) 冰醋酸 10 ml 氯仿 30 ml 无水乙醇 60 ml 二 取 材 1.外科的活体组织取材 ①临床手术取材(大标本) 注意肿瘤的部位 形状 大小 颜色及周边组织的关系 ,有无完整包膜,测量体积,包括长度 宽度 高度.手术大标本必须进行预取材 预固定. ②活体小组织(小标本) 组织标本体积小,在取材时应特别小心,用伊红让标本着色,并用插镜纸包裹,以防丢失,应标明粒数.多瓶组织应将附号标清楚. 组织块的面积通常为2.0?cmX?1.5cm，厚度不超过3.0mm。太大太厚的组织块常会固定不充分，而影响脱水和制片。组织块的数量依具体情况而定，一般以满足诊断和相关研究需要为准。? 三 脱 水 脱水的目的:组织最终将包埋在石蜡中,才能进行切片,为达到这一目的,首先须将组织内的水分置换出来,以利于透明剂渗入,这一过程为脱水.(一般情况下,应将大小标本分别脱水.标本脱水从低浓度开始,一般人标本从70%或75%乙醇,动物标本从50%乙醇开始) 脱水方法及注意事项: 常用试剂为乙醇,某些情况下用丙酮. 快速石蜡切片常用丙酮为脱水剂,尸体解剖标本一般在无水乙醇后加丙酮 因为脱水