提高高效液相色谱法定性准确性方法探讨.pdf

一 1O2一 药物分析杂志 ChinJPharmAnal2OO6，26(1) 提高高效液相色谱法定性准确性的方法探讨 王明娟，李娅萍，杨亚莉，胡昌勤 (中国药品生物制品检定所抗生素室，北京 100050) 摘要 目的：考察影响高效液相色谱中溶质相对保留时间的因素，并尝试更好的保留时间偏差校正方式。方法：以c。s柱为 例，运用甲醇一水体系，以苯／萘、甲苯／萘的相对保留时间及相对容量因子为评价指标，考察反相液相色谱系统中可能影响溶 质保留行为的因素，包括色谱柱填料、填装工艺、批号、柱效、仪器、流动相比例、流速等。并以乙酰螺旋霉索的分析为例，比较 相对保留时间法和相对容量因子法的校正效果。结果：对溶质的相对保留时间影响较大的是色谱柱填料、流动相比例和仪 器，而填装工艺、批号、柱效、流速等因素则影响不大。与相对保留时间法 比较，相对容量因子法在校正溶质保留行为的偏差 方面，效果更好。在实际样品分析时，同一类色谱柱表现出的选择性基本一致。结论：采取以下方法可以提高高效液相色谱 的定性准确性：(1)对色谱柱分类，并选择同一类色谱柱进行实验；(2)用相对容量因子代替相对保留时间校正溶质的保留行 为；(3)严格控制流动相的比例。 关键词：高效液相色谱；保留行为的校正；相对保留时间；相对容量因子 中圈分类号：R917 文献标识码 ：A 文章编号：0254—1793(2006)O1—0102一O5 A primarystudyofstandardizingHPLC retention indicesof pharmaceuticalrelatedsubsatnces WANGMing—jnan，LIYa—ping，YANGYa—li，HUChang—qin (NationalInstitutefortheControlofPharmaceuticalandBiologicalProducts，Beijing100050，China) Abstract Objective：Thepossiblefactorsinfluencingtherelativeretentiontimes(RRT)ofsolutesinHPLCmeth— odswereinvestigatedandabettercalibrationwaywasattempted．Method：UsingC18columns，amixtureofmethanol nadwaterasthemobilephase，hteinfluencesofcolumnbrand，column—packing，batchesnadefficiency，instru— ment，hteratioofcompositionsofthemobilephaseaswellastheflowrateonthereproducibilityofRRT(benzene／ naphhtalene)andRRT(toluene／naphthalene)wereinvestigated．Withhteseparationofacetylspiramycincomponents asanexample，RRTnadrelativecapacityfactors()methodswereusedtochecktheretentionbehaviorsofthefour majorcomponentsofacetylspiramycinrespectively．Results：ThereproducibilityofRRTweremainlyinfluencedby thecolumnbrand，HPLC instrumentandtheratioofcompositionsofthemobilephase，whileotherfactorsinvestiga- tedshownosignificnatinfluence．Comparedwiht theRRTmethod，hte methodprovidedabetterreproducibility．In hteseparationofacetylspiramycincomponents．theRRToravaluesobtainedwiththecolumnsfrom thesamecl